应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 做过反向PCR的筒子进来看一下吧
51/1返回列表
查看: 1683  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

shellyxss

金虫 (正式写手)

[求助] 做过反向PCR的筒子进来看一下吧 已有1人参与

我在做反向PCR是时候，方法里面说自身环化以后需要用乙醇沉淀环化产物，这个乙醇沉淀是怎么沉淀的啊？麻烦知道的筒子告知一下呗~谢谢各位啦~
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
Always be curious about nature
1楼 2014-06-01 10:21:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shellyxss

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-06-01 21:20:27
就是传统的DNA浓缩。向1体积的质粒溶液加入2.5体积冰置或者-20度放置的无水乙醇，再加入0.1倍 3M、pH5.2醋酸钠溶液,之后将混合液-20度静置30min以上(网上也有-70度放3min，不过我没试过），12000rpm   下4度 离心10 ...

啊，还有配置的醋酸钠溶液是不是需要高压蒸汽灭菌呢？
赞一下 回复此楼
Always be curious about nature
4楼2014-06-02 16:10:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
就是传统的DNA浓缩。向1体积的质粒溶液加入2.5体积冰置或者-20度放置的无水乙醇，再加入0.1倍 3M、pH5.2醋酸钠溶液,之后将混合液-20度静置30min以上(网上也有-70度放3min，不过我没试过），12000rpm   下4度 离心10min，小心弃去液体，之后再用75%乙醇漂洗一遍，12000rpm离心弃去乙醇后，真空干燥或者室温静置晾干残余乙醇，最后用一定体积的水或缓冲液溶解即可。
赞一下(1人) 回复此楼
大家相互帮助哈
2楼2014-06-01 21:20:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shellyxss

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-06-01 21:20:27
就是传统的DNA浓缩。向1体积的质粒溶液加入2.5体积冰置或者-20度放置的无水乙醇，再加入0.1倍 3M、pH5.2醋酸钠溶液,之后将混合液-20度静置30min以上(网上也有-70度放3min，不过我没试过），12000rpm   下4度 离心10 ...

请问为什么需要用醋酸钠溶液啊？
赞一下 回复此楼
Always be curious about nature
3楼2014-06-02 15:50:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by shellyxss at 2014-06-02 15:50:15
请问为什么需要用醋酸钠溶液啊？...

醋酸钠中的钠离子可以中和掉你DNA上的负电荷从而促进DNA的相互聚集从而促进沉淀。
赞一下 回复此楼
大家相互帮助哈
5楼2014-06-02 16:24:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 085601求调剂 +3 Du.11 2026-03-16 3/150 2026-03-16 20:42 by 无际的草原
[考研] 302求调剂 +3 小贾同学123 2026-03-15 5/250 2026-03-16 20:39 by zhq0425
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:35 by 沐霖12138
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +12 不知道叫什么！ 2026-03-15 14/700 2026-03-16 16:45 by 我的船我的海
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +13 enenenhui 2026-03-13 14/700 2026-03-16 15:19 by 了了了了。。
[考研] 机械专硕调剂 +3 笨笨兔子 2026-03-12 3/150 2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +8 zchqwer 2026-03-10 8/400 2026-03-14 00:01 by JourneyLucky
[考研] 0703，333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大，材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +4 薛云鹏 2026-03-13 4/200 2026-03-13 10:40 by 学员8dgXkO
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭