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ruchang2013

铁虫 (初入文坛)

[求助] 质粒快速提取 已有1人参与

图为快速质粒提取法,
根据文献“一种快速提取质粒DNA用于鉴别重组克隆的方法”进行改进
1)        取菌液1.5 mL,离心12000rpm,1 min,弃上清。
2)        加20 μL无菌水,80 μL酚/氯仿/异戊醇(25:2:1),20 μL loading buffer,激烈振荡1 min。
3)        离心12000rpm,5 min。
4)        取上清20 μL点样。(未检测到质粒)
请问大家有没有改进的高效率方法。若是重组成功质粒为7kb,原质粒是4.5kb左右,mark 是5kb.

质粒快速提取
2014.0530 快速质粒文献方法.png
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gyesang

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【答案】应助回帖

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ruchang2013: 金币+3, 有帮助 2014-05-31 14:36:40
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-05-31 21:57:30
确定你用的 酚/氯仿/异戊醇比例是25:2:1,不是25:24:1?
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2014-05-30 20:18:49
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ruchang2013

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2014-05-30 20:18:49
确定你用的 酚/氯仿/异戊醇比例是25:2:1,不是25:24:1?

我写错了,是25:24:1
3楼2014-05-31 12:25:30
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