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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒快速提取
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ruchang2013

铁虫 (初入文坛)

[求助] 质粒快速提取 已有1人参与

图为快速质粒提取法，
根据文献“一种快速提取质粒DNA用于鉴别重组克隆的方法”进行改进
1）        取菌液1.5 mL，离心12000rpm，1 min，弃上清。
2）        加20 μL无菌水，80 μL酚/氯仿/异戊醇（25：2：1），20 μL loading buffer，激烈振荡1 min。
3）        离心12000rpm，5 min。
4）        取上清20 μL点样。（未检测到质粒）
请问大家有没有改进的高效率方法。若是重组成功质粒为7kb,原质粒是4.5kb左右,mark 是5kb.

质粒快速提取
2014.0530 快速质粒文献方法.png
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1楼 2014-05-30 17:19:35
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ruchang2013: 金币+3, ★有帮助 2014-05-31 14:36:40
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-31 21:57:30
确定你用的 酚/氯仿/异戊醇比例是25：2：1，不是25：24：1？
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2014-05-30 20:18:49
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ruchang2013

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2014-05-30 20:18:49
确定你用的 酚/氯仿/异戊醇比例是25：2：1，不是25：24：1？

我写错了，是25:24:1
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3楼2014-05-31 12:25:30
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