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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 请问为什么HPLC C18柱在分析类黄酮苷时流动相中加入酸
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lhwy2515

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问为什么HPLC C18柱在分析类黄酮苷时流动相中加入酸 已有4人参与

RT，为什么在流动相中不加三乙胺之类的碱性化合物而要加入甲酸，TFA之类的酸，不同PH对黄酮苷的出峰情况有何影响
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1楼 2014-05-28 10:13:30
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轩辕义

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 谢谢交流 2014-05-28 10:37:02
lhwy2515: 金币+1, ★有帮助 2014-05-28 14:01:19
个人拙见：流动相的ph影响黄酮类化合物的存在形式，调节ph可以使黄铜类化合物以一种形态存在。
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2楼2014-05-28 10:35:00
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lhwy2515

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 轩辕义 at 2014-05-28 10:35:00
个人拙见：流动相的ph影响黄酮类化合物的存在形式，调节ph可以使黄铜类化合物以一种形态存在。

这点我同意，我的问题是，不同pH条件下黄酮类化合物结构不同，那么为什么所有色谱条件都是要调节成酸性而不能调节成碱性呢？另外我曾经试过利用碱性的流动相做但是结果是时而能在柱子上保留时而直接被冲出来，这又是为什么呢？
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3楼2014-05-28 10:39:44
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轩辕义

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lhwy2515 at 2014-05-28 10:39:44
这点我同意，我的问题是，不同pH条件下黄酮类化合物结构不同，那么为什么所有色谱条件都是要调节成酸性而不能调节成碱性呢？另外我曾经试过利用碱性的流动相做但是结果是时而能在柱子上保留时而直接被冲出来，这又 ...

黄酮类化合物因分子中多有酚羟基而呈酸性,易溶解于稀碱溶液。那我觉得可能是这个原因使得  黄酮类化合物在c18柱子上不保留？另外我昨天看见说C18柱子最好在ph2-8之间使用。
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4楼2014-05-28 10:50:44
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lhwy2515: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-05-28 11:22:43
黄酮类的多数是含有羟基结构的，加入酸一方面是抑制离解，增加保留，而使屏蔽硅羟基，改善峰形
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5楼2014-05-28 11:07:22
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sepax-Dr.G

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个和硅胶球性质有关，如果不是特别处理过的都不能在PH值太高的流动相条件下做
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我宁愿被雨打风吹日晒，被大漠风沙伤害，把心暴露在阳光下对你表白
6楼2014-05-28 11:11:52
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lhwy2515

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-05-28 11:07:22
黄酮类的多数是含有羟基结构的，加入酸一方面是抑制离解，增加保留，而使屏蔽硅羟基，改善峰形

我曾经试过利用碱性的流动相做但是结果是时而能在柱子上保留时而直接被冲出来，这又是为什么呢？我用的是waters C18BEH的柱子，pH1-12的都可以用。如果我的样品在碱性条件下分离度较好，有什么方法改善其在柱子上的保留？
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7楼2014-05-28 11:27:38
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

加入酸，避免色谱峰拖尾
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8楼2014-06-04 16:03:43
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