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请问为什么HPLC C18柱在分析类黄酮苷时流动相中加入酸
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lhwy2515
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请问为什么HPLC C18柱在分析类黄酮苷时流动相中加入酸
已有4人参与
RT,为什么在流动相中不加三乙胺之类的碱性化合物而要加入甲酸,TFA之类的酸,不同PH对黄酮苷的出峰情况有何影响
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1楼
2014-05-28 10:13:30
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轩辕义
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2014-05-28 10:37:02
lhwy2515: 金币+1,
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2014-05-28 14:01:19
个人拙见:流动相的ph影响黄酮类化合物的存在形式,调节ph可以使黄铜类化合物以一种形态存在。
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2楼
2014-05-28 10:35:00
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2楼
:
Originally posted by
轩辕义
at 2014-05-28 10:35:00
个人拙见:流动相的ph影响黄酮类化合物的存在形式,调节ph可以使黄铜类化合物以一种形态存在。
这点我同意,我的问题是,不同pH条件下黄酮类化合物结构不同,那么为什么所有色谱条件都是要调节成酸性而不能调节成碱性呢?另外我曾经试过利用碱性的流动相做但是结果是时而能在柱子上保留时而直接被冲出来,这又是为什么呢?
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3楼
2014-05-28 10:39:44
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3楼
:
Originally posted by
lhwy2515
at 2014-05-28 10:39:44
这点我同意,我的问题是,不同pH条件下黄酮类化合物结构不同,那么为什么所有色谱条件都是要调节成酸性而不能调节成碱性呢?另外我曾经试过利用碱性的流动相做但是结果是时而能在柱子上保留时而直接被冲出来,这又 ...
黄酮类化合物因分子中多有酚羟基而呈酸性,易溶解于稀碱溶液。那我觉得可能是这个原因使得 黄酮类化合物在c18柱子上不保留?另外我昨天看见说C18柱子最好在ph2-8之间使用。
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4楼
2014-05-28 10:50:44
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wyy080214
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2014-05-28 11:22:43
黄酮类的多数是含有羟基结构的,加入酸一方面是抑制离解,增加保留,而使屏蔽硅羟基,改善峰形
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2014-05-28 11:07:22
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这个和硅胶球性质有关,如果不是特别处理过的都不能在PH值太高的流动相条件下做
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我宁愿被雨打风吹日晒,被大漠风沙伤害,把心暴露在阳光下对你表白
6楼
2014-05-28 11:11:52
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5楼
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wyy080214
at 2014-05-28 11:07:22
黄酮类的多数是含有羟基结构的,加入酸一方面是抑制离解,增加保留,而使屏蔽硅羟基,改善峰形
我曾经试过利用碱性的流动相做但是结果是时而能在柱子上保留时而直接被冲出来,这又是为什么呢?我用的是waters C18BEH的柱子,pH1-12的都可以用。如果我的样品在碱性条件下分离度较好,有什么方法改善其在柱子上的保留?
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7楼
2014-05-28 11:27:38
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加入酸,避免色谱峰拖尾
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8楼
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