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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 如何再生菲罗门c18柱
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鸢尾123

新虫 (小有名气)

[求助] 如何再生菲罗门c18柱 已有5人参与

最近在走一个生物样品，处理出来的样品，用流动相溶解不好，有白色混悬物，进样后，柱子柱压很高，初步判断为柱前端堵了，用甲醇，异丙醇反冲，柱压没降，不知道怎么再生

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1楼 2014-05-24 11:49:50
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炜少

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 谢谢应助交流 2014-05-24 19:46:56
生物样品前处理不去蛋白吗？ 柱子前端堵了你应该把筛板拆下来超声处理，大分子多的样不应该反冲，反冲以后就不能正方向用了  只能反着用了
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Whenthepainyoufeelsad,itisbesttolearnwhatthings.Learningwillmakeyouforeverremaininvincible.
2楼2014-05-24 17:22:39
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轩辕义

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
生物样品一定要过滤膜，血的教训。筛板自己拆下来超声吧，效果还不好的话买新的吧
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3楼2014-05-25 21:40:26
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
浑浊液怎么能上样呢，看你样品在什么条件下溶解性比较好，反冲一下试试看了，这种情况，不一定有效果了。
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人生若只如初见...
4楼2014-05-26 10:30:16
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鸢尾123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 炜少 at 2014-05-24 17:22:39
生物样品前处理不去蛋白吗？ 柱子前端堵了你应该把筛板拆下来超声处理，大分子多的样不应该反冲，反冲以后就不能正方向用了  只能反着用了

用乙酸乙酯萃取了，以前做实验时，基本都把蛋白去除了，到最近因为科研中心搬走了，用的是怡宝水来配置的tris_hcl，发现有浑浊现象，我也用离心机离过，但样品还是不澄清

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5楼2014-06-04 17:33:51
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鸢尾123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by daisyzhangwei at 2014-05-26 10:30:16
浑浊液怎么能上样呢，看你样品在什么条件下溶解性比较好，反冲一下试试看了，这种情况，不一定有效果了。

试过，甲醇，乙腈，异丙醇，三氯甲烷，四氢呋喃，乙酸乙酯，都没办法溶解

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6楼2014-06-04 17:37:23
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……
引用回帖:
6楼: Originally posted by 鸢尾123 at 2014-06-04 17:37:23
试过，甲醇，乙腈，异丙醇，三氯甲烷，四氢呋喃，乙酸乙酯，都没办法溶解
...

也可以调样品的pH值试试溶解性
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人生若只如初见...
7楼2014-06-05 14:10:24
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秀古书生

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

额，下次一定要记得，进针前样品要过滤！
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8楼2014-06-05 16:21:44
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

清洗柱前筛板，有预柱更好，更换预柱。
如果水溶性蛋白，那么用较高水相和温度长时间冲洗。
最后的办法就是反冲
上述还不行，建议换色谱柱
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9楼2014-06-06 09:41:44
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鸢尾123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 秀古书生 at 2014-06-05 16:21:44
额，下次一定要记得，进针前样品要过滤！

进了两针比较浑浊的，觉得会对柱子影响大，就都过滤了。但是当时都没有什么明显的问题，但是第二天用的时候就发现有问题了

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10楼2014-06-07 19:10:10
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