| 查看: 1773 | 回复: 5 | |||
蓝默儿金虫 (小有名气)
|
[求助]
ELISA空白值过高 已有2人参与
|
| 进行的是夹心ELISA，用多抗做包被抗体，抗原为原核表达的蛋白，之后加酶标单抗。空白对照孔是不加抗原，加的是PBS，其它相同。 |
回复此楼» 猜你喜欢
290分材料工程085601求调剂 数二英一
已经有3人回复
-
0856调剂
已经有7人回复
-
化工专硕348，一志愿985求调剂
已经有9人回复
-
0856化工专硕求调剂
已经有14人回复
-
282求调剂
已经有5人回复
-
诚招农业博士
已经有3人回复
-
材料学硕318求调剂
已经有9人回复
-
338求调剂
已经有3人回复
-
材料与化工328求调剂
已经有3人回复
-
289求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- ELISA空白值在0.05-0.08正常吗？
已经有4人回复
- 做总磷空白值高
已经有9人回复
- 双抗夹心ELISA 空白值偏高
已经有3人回复
- ELISA 显色液空白OD偏高，P/N偏小，是否可以每孔OD减去显色液对照的值?
已经有5人回复
- 【求助/交流】双抗体夹心ELISA的空白孔该怎么设置？
已经有6人回复
antibodyknow
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 306.6
- 红花: 3
- 帖子: 24
- 在线: 11.7小时
- 虫号: 3131806
- 注册: 2014-04-12
- 专业: 抗体工程学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
蓝默儿: 金币+3, ★有帮助 2014-05-23 09:43:10
感谢参与，应助指数 +1
蓝默儿: 金币+3, ★有帮助 2014-05-23 09:43:10
|
两种可能： 1.你的包被用的多抗与酶标单抗之间有交叉反应。检查一下你的多抗是哪种多抗：鼠多抗，兔多抗还是羊多抗？你的酶标单抗与多抗最好是同一种来源。多抗做包被抗体本身就不是一个好选择，容易出现交叉反应，导致背景高。 2.你的整个ELISA过程是否封闭、洗涤充分。建议在所用的封闭和洗涤buffer中加Tween20至0.1%，减少非特异性结合。 3.建议做一个完全空白对照，即包被时用PBS，封闭环节正常，样品用PBS，然后正常加酶标二抗。可以初步判断你的ELISA系统是否正常，进而可以判断出你的多抗和二抗间是否有交叉反应。 祝好运！ |
2楼2014-05-22 22:37:00
蓝默儿
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1281.8
- 散金: 19
- 帖子: 80
- 在线: 88.4小时
- 虫号: 1695664
- 注册: 2012-03-16
- 性别: MM
- 专业: 兽医传染病学
3楼2014-05-23 09:44:53
159236478
至尊木虫 (知名作家)
游来游去之一级游神
- BioEPI: 3
- 应助: 23 (小学生)
- 金币: 34969.8
- 散金: 250
- 红花: 8
- 帖子: 9131
- 在线: 804.5小时
- 虫号: 407039
- 注册: 2007-06-19
- 性别: GG
- 专业: 抗体工程学
4楼2014-05-23 19:39:33
5楼2016-12-23 13:41:46
Qq16
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 65.9
- 帖子: 27
- 在线: 4.7小时
- 虫号: 16080840
- 注册: 2019-08-21
- 性别: MM
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
6楼2019-09-20 15:08:24
5