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bw2318

木虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by woodsorrel at 2014-05-23 15:14:44
那你就提吧,但是加热后的蛋白用Xiong的方法是指不出来的,建议上8M尿素,方法参考《热处理下的猪肉蛋白质特性》,食品科学。...

前辈用次方法提过吗?  我觉得这篇文献很好。。但有些问题还需要前辈指点下。
1.沉淀物中添加 40ml 含有8mol/L 尿素和1%(W/V)巯基乙醇缓冲液。
     这个缓冲液如何配置的? 用的是磷酸缓冲液配置吗?
2.那个4℃的冷冻离心要求达不到,影响大不大?


麻烦你解答下哈,谢谢啦!!
21楼2014-05-27 10:27:04
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woodsorrel

木虫 (正式写手)

引用回帖:
21楼: Originally posted by bw2318 at 2014-05-27 10:27:04
前辈用次方法提过吗?  我觉得这篇文献很好。。但有些问题还需要前辈指点下。
1.沉淀物中添加 40ml 含有8mol/L 尿素和1%(W/V)巯基乙醇缓冲液。
     这个缓冲液如何配置的? 用的是磷酸缓冲液配置吗?
2.那个4℃ ...

没有提过,这个具体用什么配你查下他引用的原始文献吧,还有巯基乙醇用的话你要考虑一下对你后面的指标有没有影响,因为它是还原二硫键的;冷冻离心的话我觉得影响应该不太大,因为你的已经是热变性的肉了,4℃离心一般是为了保持生物活性、抑菌之类的,对你实验应该还好,影响不会太大。
22楼2014-05-27 19:15:05
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漠语尘

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by bw2318 at 2014-05-22 14:04:29
我提取的是肌原纤维蛋白,但经过几次预实验发现40-90℃几乎提不出来了。不知你师姐提取温度多高,时间多长?...

提肌球蛋白和肌原纤维蛋白都是在低温(如4℃)下提取吧,蛋白质在热处理的过程中会变性解螺旋呐
向上、谦逊、涵养、明志
23楼2018-05-18 09:53:12
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临川之笔

铜虫 (初入文坛)

有个问题哈,对于肉加热后提取肌原纤维蛋白质,如何能确定是热变性后的肌原纤维蛋白,这和先把蛋白提出来,再加热变性差距不小吧。
24楼2018-08-31 23:35:55
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winterb

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以提取.顺便一提
蛋白的变性是不可逆的反应,这个结论是错误的。
25楼2018-09-02 00:31:10
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