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544534326

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我以前做鱼肉时,80℃四个分界线,前后的蛋白质电泳条带迥异,不过我研究的都是总蛋白质的
人活着就要保持一种劳作的状态!
11楼2014-05-22 21:53:47
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bw2318

木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by woodsorrel at 2014-05-22 19:52:50
如果你是用低离子强度缓冲液洗走肌浆蛋白的方法(例如Xiong的方法),加热之后的肉是提不出来的,变性的肉可以用8M尿素的方法,但蛋白质提出来之后是更加变性的状态(二、三级结构被破坏),跑电泳、测巯基之类的可 ...

我要测巯基,浊度,晗变。。所以不能再变性了。。但我用低浓度的盐提取又提不出来。。所以不知道哪出问题了

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12楼2014-05-23 08:09:30
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bw2318

木虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 544534326 at 2014-05-22 21:53:47
我以前做鱼肉时,80℃四个分界线,前后的蛋白质电泳条带迥异,不过我研究的都是总蛋白质的

我是肌原纤维蛋白,还是有差别的

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13楼2014-05-23 08:11:33
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bw2318

木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by woodsorrel at 2014-05-22 19:52:50
如果你是用低离子强度缓冲液洗走肌浆蛋白的方法(例如Xiong的方法),加热之后的肉是提不出来的,变性的肉可以用8M尿素的方法,但蛋白质提出来之后是更加变性的状态(二、三级结构被破坏),跑电泳、测巯基之类的可 ...

我加热之后,蛋白质应该也变性了,提取肌原纤维蛋白就是提不出来

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14楼2014-05-23 08:14:04
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woodsorrel

木虫 (正式写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by bw2318 at 2014-05-23 08:09:30
我要测巯基,浊度,晗变。。所以不能再变性了。。但我用低浓度的盐提取又提不出来。。所以不知道哪出问题了
...

我觉得你巯基可以用8 M尿素的方法,因为你后面测巯基的时候还要用高浓度的变性剂;浊度的你为什么不先把蛋白提出来,再加热呢?晗变如果你没特殊要求的话,可以直接测肉的啊。
15楼2014-05-23 08:35:47
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544534326

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by bw2318 at 2014-05-23 08:11:33
我是肌原纤维蛋白,还是有差别的
...

我觉得其中降解的部分就是计院纤维蛋白的
人活着就要保持一种劳作的状态!
16楼2014-05-23 09:02:48
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bw2318

木虫 (小有名气)

引用回帖:
15楼: Originally posted by woodsorrel at 2014-05-23 08:35:47
我觉得你巯基可以用8 M尿素的方法,因为你后面测巯基的时候还要用高浓度的变性剂;浊度的你为什么不先把蛋白提出来,再加热呢?晗变如果你没特殊要求的话,可以直接测肉的啊。...

测巯基我是要用尿素,我的主要想法是先提出蛋白然后配成所需浓度来进行测量指标。。。

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17楼2014-05-23 09:07:26
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bw2318

木虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 544534326 at 2014-05-23 09:02:48
我觉得其中降解的部分就是计院纤维蛋白的...

所以,你认为加热变性后还能提出来吗?

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18楼2014-05-23 09:08:41
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woodsorrel

木虫 (正式写手)

引用回帖:
17楼: Originally posted by bw2318 at 2014-05-23 09:07:26
测巯基我是要用尿素,我的主要想法是先提出蛋白然后配成所需浓度来进行测量指标。。。
...

那你就提吧,但是加热后的蛋白用Xiong的方法是指不出来的,建议上8M尿素,方法参考《热处理下的猪肉蛋白质特性》,食品科学。
19楼2014-05-23 15:14:44
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bw2318

木虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by woodsorrel at 2014-05-23 15:14:44
那你就提吧,但是加热后的蛋白用Xiong的方法是指不出来的,建议上8M尿素,方法参考《热处理下的猪肉蛋白质特性》,食品科学。...

呃,我就是用那方法提不出来。所以在想办法。。。我这实验主要看的就是加热对蛋白的影响,如果用多余的变性剂可能对结果影响很大

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20楼2014-05-23 16:48:37
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