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bw2318

木虫 (小有名气)

[求助] 40-90℃变性后的肉中还能提出蛋白质吗?已有8人参与

蛋白质变性后还能提出来吗?
求各位帮忙。。
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woodsorrel

木虫 (正式写手)

引用回帖:
21楼: Originally posted by bw2318 at 2014-05-27 10:27:04
前辈用次方法提过吗?  我觉得这篇文献很好。。但有些问题还需要前辈指点下。
1.沉淀物中添加 40ml 含有8mol/L 尿素和1%(W/V)巯基乙醇缓冲液。
     这个缓冲液如何配置的? 用的是磷酸缓冲液配置吗?
2.那个4℃ ...

没有提过,这个具体用什么配你查下他引用的原始文献吧,还有巯基乙醇用的话你要考虑一下对你后面的指标有没有影响,因为它是还原二硫键的;冷冻离心的话我觉得影响应该不太大,因为你的已经是热变性的肉了,4℃离心一般是为了保持生物活性、抑菌之类的,对你实验应该还好,影响不会太大。
22楼2014-05-27 19:15:05
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dinglong178

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们酶解其他蛋白的时候都会先90度破坏一下蛋白质结构
我老婆爱吃肉,,,
2楼2014-05-22 09:58:53
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hws0110

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
能提取,但不能保证结构不变化.
foodfood
3楼2014-05-22 11:52:38
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朱珍

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以提取,实验室师姐提取原肌球蛋白的的时候,就是先把样品煮了之后才提取的,变性之后也就是有些热不稳定蛋白会分解,有些会变性,别的没多大影响
4楼2014-05-22 12:31:42
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