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这样一段基因该如何调取,请指教,谢谢
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q0cheng
木虫
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[
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]
这样一段基因该如何调取,请指教,谢谢
已有2人参与
大家好,最近在调基因,遇到难题,特来请教!
我要从细菌的体内调取一个酶的全长序列,全片段长495bp;目前已经P出一段序列455bp左右,在全长的中间(依据同源性设计的引物),左边剩余25bp;右边20碱基;我应该用什么方法把这两端的序列P出来呢?
请高手指教,谢谢!
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【求助/交流】调取基因
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2014-05-21 17:10:16
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quiller2000
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2014-05-22 04:06:32
就是扩侧翼序列撒,这个很容易,要么你用缫式PCR,要么你先消化基因组,然后环化以后,设计引物扩增,都很容易搞,除非你的序列很特殊!
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q0cheng
致良知
2楼
2014-05-21 22:00:10
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引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
quiller2000
at 2014-05-21 22:00:10
就是扩侧翼序列撒,这个很容易,要么你用缫式PCR,要么你先消化基因组,然后环化以后,设计引物扩增,都很容易搞,除非你的序列很特殊!
你好,请用什么酶消化,如何环化?基因组的总序列又不知道。能不能麻烦你说详细点?
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3楼
2014-05-22 09:43:33
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木虫
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专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流!
2014-05-22 13:10:05
你查一下染色体步移吧,包括ipcr,TAIL PCR之类的,可以用的方法很多
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4楼
2014-05-22 10:38:02
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