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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 这样一段基因该如何调取，请指教，谢谢
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q0cheng

木虫 (小有名气)

[求助] 这样一段基因该如何调取，请指教，谢谢 已有2人参与

大家好，最近在调基因，遇到难题，特来请教！

我要从细菌的体内调取一个酶的全长序列，全片段长495bp；目前已经P出一段序列455bp左右，在全长的中间（依据同源性设计的引物），左边剩余25bp；右边20碱基；我应该用什么方法把这两端的序列P出来呢？

请高手指教，谢谢！
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1楼 2014-05-21 17:10:16
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-05-22 04:06:32
就是扩侧翼序列撒，这个很容易，要么你用缫式PCR，要么你先消化基因组，然后环化以后，设计引物扩增，都很容易搞，除非你的序列很特殊！
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q0cheng
致良知
2楼2014-05-21 22:00:10
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q0cheng

木虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by quiller2000 at 2014-05-21 22:00:10
就是扩侧翼序列撒，这个很容易，要么你用缫式PCR，要么你先消化基因组，然后环化以后，设计引物扩增，都很容易搞，除非你的序列很特殊！

你好，请用什么酶消化，如何环化？基因组的总序列又不知道。能不能麻烦你说详细点？
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3楼2014-05-22 09:43:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-22 13:10:05
你查一下染色体步移吧，包括ipcr,TAIL PCR之类的，可以用的方法很多
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4楼2014-05-22 10:38:02
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