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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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q0cheng

木虫 (小有名气)

[求助] 这样一段基因该如何调取,请指教,谢谢 已有2人参与

大家好,最近在调基因,遇到难题,特来请教!

我要从细菌的体内调取一个酶的全长序列,全片段长495bp;目前已经P出一段序列455bp左右,在全长的中间(依据同源性设计的引物),左边剩余25bp;右边20碱基;我应该用什么方法把这两端的序列P出来呢?

请高手指教,谢谢!
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-05-22 04:06:32
就是扩侧翼序列撒,这个很容易,要么你用缫式PCR,要么你先消化基因组,然后环化以后,设计引物扩增,都很容易搞,除非你的序列很特殊!

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

致良知
2楼2014-05-21 22:00:10
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q0cheng

木虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by quiller2000 at 2014-05-21 22:00:10
就是扩侧翼序列撒,这个很容易,要么你用缫式PCR,要么你先消化基因组,然后环化以后,设计引物扩增,都很容易搞,除非你的序列很特殊!

你好,请用什么酶消化,如何环化?基因组的总序列又不知道。能不能麻烦你说详细点?
3楼2014-05-22 09:43:33
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-22 13:10:05
你查一下染色体步移吧,包括ipcr,TAIL PCR之类的,可以用的方法很多
4楼2014-05-22 10:38:02
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