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予岑

银虫 (小有名气)

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[求助] 生物素和链霉亲和素已有1人参与

我想让生物素和链霉亲和素1:1结合，链霉亲和素的量应该远远大于生物素的量，但应该具体怎么操作，才能尽量保证他们是1;1结合

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1楼 2014-05-21 13:32:18

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寂静之林

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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予岑: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-11-25 22:14:03

其实我比较好奇为什么楼主想要生物素和链霉亲和素以1:1的比例结合。
理论上，一个链霉亲和素可以和4个生物素结合，但是当生物素与其他蛋白偶联在一起的时候，由于空间位阻等的影响，是不可能实现生物素：链霉亲和素=4:1的比例结合的，大概会是1:1到1:2的比例吧，这从生物素-链霉亲和素系统的放大效应来看，也是符合的。而如果把亲和素偶联到固相载体上，就更能降低生物素和链霉亲和素的结合比例了。据我了解，有一种免疫检测技术，就是同时应用上面这两种方法的——均相免疫荧光检测技术。
说不定楼主可以从上面的技术得到一些启发吧。但还是没有什么办法可以确定一个生物素分子只跟一个链霉亲和素分子结合，这才是最麻烦的地方。

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