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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助大神！DNA-PAGE一直出现问题，不知道什么原因，请求大神回复帮忙解决。
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forlovefang

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助大神！DNA-PAGE一直出现问题，不知道什么原因，请求大神回复帮忙解决。 已有5人参与

我的PCR产物纯化之后，大小150bp左右，跑了个DNA-page，结果跑胶途中看到胶孔两边拖带，照胶，marker也出现两边拖带，跑了几次，每次都是换全新的TBE、APS，胶板也洗的很干净，每次都出现这个问题，不知道是什么原因，请知道的大神帮忙解决一下，万分感谢。

求助大神！DNA-PAGE一直出现问题，不知道什么原因，请求大神回复帮忙解决。
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求助大神！DNA-PAGE一直出现问题，不知道什么原因，请求大神回复帮忙解决。-1
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1楼 2014-05-21 11:05:28
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★
forlovefang(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-10 20:51:12
感觉初始的时候压缩的不太好，所以后来跑的时候就会出现两边的带。先低电压然后高电压
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天行健
8楼2014-06-07 23:29:49
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普通回帖

forlovefang

新虫 (初入文坛)
自顶一记，机器人根本不管用
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2楼2014-05-21 16:30:52
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谁呀你是谁呀

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
forlovefang(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-22 19:21:34
上样buffer是不是用很久了，在加点儿甘油试试；另外TBE是不是有沉淀了？
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等等等等
3楼2014-05-21 20:12:04
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forlovefang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 谁呀你是谁呀 at 2014-05-21 20:12:04
上样buffer是不是用很久了，在加点儿甘油试试；另外TBE是不是有沉淀了？

loading buffer是新的，TBE也是新配的，试剂什么的都是新配的
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4楼2014-05-22 10:52:22
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OlivarD

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
电压太高了，跑太快了
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5楼2014-05-22 16:22:34
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forlovefang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by OlivarD at 2014-05-22 16:22:34
电压太高了，跑太快了

一直是最低电压，80V跑的啊
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6楼2014-05-22 19:21:01
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Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by forlovefang at 2014-05-22 19:21:01
一直是最低电压，80V跑的啊...

一般来说，marker除了能检测DNA的分子质量外，还可以侧面反应你的胶是否制的成功，建议测一下TBE的pH。
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7楼2014-06-07 22:37:58
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forlovefang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-06-07 23:29:49
感觉初始的时候压缩的不太好，所以后来跑的时候就会出现两边的带。先低电压然后高电压

好像确实是这个原因，那怎么样才能压缩好啊？电压80V已经是最低电压了
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9楼2014-06-10 16:28:04
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youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★
forlovefang(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-24 20:45:26
引用回帖:
9楼: Originally posted by forlovefang at 2014-06-10 16:28:04
好像确实是这个原因，那怎么样才能压缩好啊？电压80V已经是最低电压了...

我们用的电泳仪倒是可以调电压
就是那种跑琼脂糖电泳用的电泳仪
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天行健
10楼2014-06-10 17:50:12
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