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小伟少

新虫 (小有名气)

[交流] 这俩峰怎么分都分不开 试了半天 请大家帮我分析分析还有什么办法能分开他们 已有18人参与

我用的是C18  4.6×250mm 5μm的柱子     流速0.5ml/min  流动相是甲醇水   比列是85::15   70:30  50:50 这几种比例都试了 都分不开  请问有什么办法能分开啊

这俩峰怎么分都分不开 试了半天 请大家帮我分析分析还有什么办法能分开他们
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小伟少: 回帖置顶 2014-05-21 12:18:37
首先,内径4.6mm的柱子,0.5ml/min的流速太低,就这个流速,还出峰这么快,根本没有保留。你给出这部分结构看,这个化合物应该有保留性,但在酸性条件下可能离子化而没有保留,建议用pH7.0缓冲体系试试。另一方面,你有机相比例也蛮高,可以考虑再降低。还有,看你两个峰顶看是分开了,但峰低相连,需要注意是否有互变异构体。
快乐不需要走遍天涯去寻找,只需播一粒种子在脚下。
18楼2014-05-21 08:57:34
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)


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pH7.0一般用磷酸盐,10nmol浓度就可以了(磷酸铵、磷酸钠、磷酸钾盐均可);反相色谱(流动相极性大于固定相极性为反相色谱)中,一般极性化合物先出峰,弱极性化合物后出峰,若果带酸碱基团,则流动相的pH值对其保留性影响较大;很多异构体都能在反相中分离(顺反异构、取代点位不同产生的异构、烯醇互变异构、甚至手性异构体)。
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27楼2014-05-21 13:20:41
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