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chenyuanli木虫 (小有名气)
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凝胶色谱分离蛋白问题 已有1人参与
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大家好： 最近在用SEC-150分子筛分离血浆蛋白，该分子筛的分离范围为500 - 150,000，目的蛋白分子量为180K，重要杂蛋白为66K和40K左右，我大概计算了一下柱体积约为14.3ml，柱床体积约为5.1ml，也就是说分离体积为9.2ml。理论上说，目的蛋白应该在洗脱5.1ml时出现，而主要杂蛋白应该在洗脱5.1ml之后的某时间点分别出现。但是问题出来了，总是在洗脱5.1ml之后出现一个大峰，调整了几次流速，分别为0.35ml/min、0.5ml/min、1.0ml/min，流动相为150mM磷酸盐溶液。求大牛解释。  |
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