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求问线粒体分离纯度检测的操作步骤
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铁虫
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[交流]
求问线粒体分离纯度检测的操作步骤
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各位大侠,最近我在做线粒体分离,想在进行下一步之前确认自己分离的纯度如何。看文献上写的好像是用VDAC和F-actin来分别代表线粒体和胞浆蛋白。之前虽然看到有人在小木虫上问过相关问题,但是因为我完全是生物入门,也不知道究竟应该怎么来测这个东西,都应该买些什么试剂。不知道各位能不能给个比较详细的protocol。跪谢!
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1楼
2014-05-07 09:13:33
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铁虫
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专业: 活体与复杂样品分析
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6楼
:
Originally posted by
CasGene
at 2014-05-11 14:03:32
多看文献,看你这个问题就知道你很多东西还不明白。
通过密度梯度离心。
对不同的fraction测活性,如线粒体特有的活性,溶酶体体特有的活性。
或者跑western,用不同细胞器特有的蛋白抗体来看。
这样才 ...
请问是什么类型的试剂盒?能给个名字或链接不?
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7楼
2014-05-14 11:08:09
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专业: 活体与复杂样品分析
如果只做凝胶电泳之后染色的话,细胞里各种蛋白是不是干扰较大?要用特定的荧光免疫手段么?
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2楼
2014-05-07 14:40:54
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专业: 化学毒理学
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3楼
2014-05-07 22:54:09
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3楼
:
Originally posted by
anytime_ml
at 2014-05-07 22:54:09
你分离的是动物线粒体还是植物线粒体?还是从培养的细胞中提取线粒体?VDAC是线粒体上的一种蛋白质.
是从培养的细胞中提取线粒体。我看文献上用VDAC和F-actin来表征分离之后线粒体胞浆分别的纯度
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4楼
2014-05-08 00:03:34
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