24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2209  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

七小艾

新虫 (小有名气)

[求助] 葡萄糖脱氢酶催化葡萄糖反应产物是什么?? 已有2人参与

如题,各位大神,求教葡萄糖脱氢酶(NADP+依赖型)催化葡萄糖反应产物是什么?文献和导师都说是葡萄糖酸,可是为嘛我做出来不是的。。。
我是用自己纯化的纯酶做的反应。
由于葡萄糖酸标准品不好买,所以买了葡萄糖酸钠的标准品,再将反应液用NaOH处理后做液相检测。
1、反应液的出峰时间和葡萄糖酸钠标准品出峰时间不一样。
2、而且在底物(葡萄糖)浓度低于葡萄糖酸钠标准品的情况下,反应液的液相峰面积却比葡萄糖酸钠标准品大得多。
有文献说葡萄糖酸会被葡萄糖酸脱氢酶进一步氧化,可是就算我的酶没有纯好,这个葡萄糖酸脱氢酶反应也是要辅酶参与的呀,而且不可能所有的葡萄糖酸都反应掉了牙。在下百思不得其解,求各位大神帮帮忙啊,再做不出来就要换课题了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyw30

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 七小艾 at 2014-05-12 14:59:35
酶是预先测过酶活的,确定有比较高的活性。
由于NADP有点贵,所以只做了EP管小试,反应过程中没有控制过pH。
标准品加到反应液中是做什么的?看标准品还会不会出峰吗?
已经排除了缓冲液和底物出峰,现在在考虑 ...

加相同量的标准品到反应液中,看出不出峰,有可能产物浓度低,信号被掩盖。NADP在210nm下检测,应该信号很弱,但浓度如果过高,也会出峰的。也许是测量方法的问题,做做空白对照。如果确实反应了,NADP会全部或部分变成NADPH。
创科生物-酶催化www.novocata.com
5楼2014-05-21 12:44:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

欧阳隐飞

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

调酸之后,液相检测,看看行不行的
没把握的哈

酶纯化一定要好的哈
2楼2014-05-11 17:04:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyw30

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

肯定是生成葡萄糖酸,不同pH值体系中则可能为钠盐或酸的形式。
需从三个方面来判断:
1.确定检测方法是否正确,标准品可加在反应液中作对照
2.酶是否正确,是否具有活性,酶活检测,可用分光法测定NADP
3.反应条件是否合适,温度、pH值、试剂、浓度等。
创科生物-酶催化www.novocata.com
3楼2014-05-11 18:38:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

七小艾

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hyw30 at 2014-05-11 18:38:47
肯定是生成葡萄糖酸,不同pH值体系中则可能为钠盐或酸的形式。
需从三个方面来判断:
1.确定检测方法是否正确,标准品可加在反应液中作对照
2.酶是否正确,是否具有活性,酶活检测,可用分光法测定NADP
3.反应条 ...

酶是预先测过酶活的,确定有比较高的活性。
由于NADP有点贵,所以只做了EP管小试,反应过程中没有控制过pH。
标准品加到反应液中是做什么的?看标准品还会不会出峰吗?
已经排除了缓冲液和底物出峰,现在在考虑是不是有可能是NADP出峰,不知NADP在210nm紫外检测下有没有可能出峰?
4楼2014-05-12 14:59:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 273求调剂 +20 麦小叮当 2026-04-06 23/1150 2026-04-06 22:22 by 蓝云思雨
[考研] 362求调剂 +5 我要考大 2026-04-06 7/350 2026-04-06 21:27 by 啵啵啵0119
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +10 cs0106 2026-04-05 12/600 2026-04-06 19:41 by 无际的草原
[考研] 材料与化工363求推荐 +11 zh096 2026-04-04 11/550 2026-04-06 19:14 by guanxin1001
[考研] 生物学学硕求调剂:351分一志愿南京师范大学生物学专业 +6 …~、王…~ 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:54 by macy2011
[考研] 一志愿河北工业大学材料工程,初试344求专硕调剂 +6 15933906766 2026-04-05 6/300 2026-04-06 13:21 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +10 chenxrlkx 2026-04-05 10/500 2026-04-06 11:31 by 猪会飞
[考研] 一志愿211生物学280分 求调剂 +5 李rien 2026-04-05 5/250 2026-04-06 10:30 by zhyzzh
[考研] 复试调剂 +8 春日来信- 2026-04-03 8/400 2026-04-05 18:58 by 蓝云思雨
[考研] 考研调剂生寻找导师 +3 顾瞻考研啊 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:18 by 啵啵啵0119
[考研] 348求调剂 +6 wukira 2026-04-04 6/300 2026-04-05 18:11 by 猪会飞
[考研] 材料调剂 +9 革微桂 2026-04-04 9/450 2026-04-05 08:27 by 544594351
[考研] 能动调剂326专硕 +4 wan112233 2026-04-04 4/200 2026-04-04 22:47 by yu221
[考研] 323求调剂 +8 李佳乐1 2026-04-04 8/400 2026-04-04 22:26 by hemengdong
[考研] 一志愿武理材料工程302调剂环化或化工 +19 Doleres 2026-03-31 20/1000 2026-04-04 16:44 by 啊俊!
[考研] 一志愿深大085601材料工程专业(专硕)300分可以调剂去哪 +8 10160315 2026-04-02 8/400 2026-04-03 09:36 by hypershenger
[考研] 一志愿武汉理工0856,初试334 +3 26考研材料 2026-04-02 3/150 2026-04-02 21:22 by dongzh2009
[考研] 0805求调剂 +8 是水分 2026-03-31 8/400 2026-04-02 10:46 by guanxin1001
[考研] 考研材料工程351分调剂 +5 整个好的 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:36 by topgun2009
[考研] 070300化学专业279调剂 +10 哈哈哈^_^ 2026-03-31 10/500 2026-03-31 23:13 by liu823948201
信息提示
请填处理意见