应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 葡萄糖脱氢酶催化葡萄糖反应产物是什么？？
51/1返回列表
查看: 2458  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

七小艾

新虫 (小有名气)

[求助] 葡萄糖脱氢酶催化葡萄糖反应产物是什么？？ 已有2人参与

如题，各位大神，求教葡萄糖脱氢酶（NADP+依赖型）催化葡萄糖反应产物是什么？文献和导师都说是葡萄糖酸，可是为嘛我做出来不是的。。。
我是用自己纯化的纯酶做的反应。
由于葡萄糖酸标准品不好买，所以买了葡萄糖酸钠的标准品，再将反应液用NaOH处理后做液相检测。
1、反应液的出峰时间和葡萄糖酸钠标准品出峰时间不一样。
2、而且在底物（葡萄糖）浓度低于葡萄糖酸钠标准品的情况下，反应液的液相峰面积却比葡萄糖酸钠标准品大得多。
有文献说葡萄糖酸会被葡萄糖酸脱氢酶进一步氧化，可是就算我的酶没有纯好，这个葡萄糖酸脱氢酶反应也是要辅酶参与的呀，而且不可能所有的葡萄糖酸都反应掉了牙。在下百思不得其解，求各位大神帮帮忙啊，再做不出来就要换课题了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-06 21:51:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

七小艾

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hyw30 at 2014-05-11 18:38:47
肯定是生成葡萄糖酸，不同pH值体系中则可能为钠盐或酸的形式。
需从三个方面来判断：
1.确定检测方法是否正确，标准品可加在反应液中作对照
2.酶是否正确，是否具有活性，酶活检测，可用分光法测定NADP
3.反应条 ...

酶是预先测过酶活的，确定有比较高的活性。
由于NADP有点贵，所以只做了EP管小试，反应过程中没有控制过pH。
标准品加到反应液中是做什么的？看标准品还会不会出峰吗？
已经排除了缓冲液和底物出峰，现在在考虑是不是有可能是NADP出峰，不知NADP在210nm紫外检测下有没有可能出峰？
赞一下 回复此楼
4楼2014-05-12 14:59:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

欧阳隐飞

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

调酸之后，液相检测，看看行不行的
没把握的哈

酶纯化一定要好的哈
赞一下 回复此楼
2楼2014-05-11 17:04:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyw30

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

肯定是生成葡萄糖酸，不同pH值体系中则可能为钠盐或酸的形式。
需从三个方面来判断：
1.确定检测方法是否正确，标准品可加在反应液中作对照
2.酶是否正确，是否具有活性，酶活检测，可用分光法测定NADP
3.反应条件是否合适，温度、pH值、试剂、浓度等。
赞一下 回复此楼
创科生物-酶催化www.novocata.com
3楼2014-05-11 18:38:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyw30

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 七小艾 at 2014-05-12 14:59:35
酶是预先测过酶活的，确定有比较高的活性。
由于NADP有点贵，所以只做了EP管小试，反应过程中没有控制过pH。
标准品加到反应液中是做什么的？看标准品还会不会出峰吗？
已经排除了缓冲液和底物出峰，现在在考虑 ...

加相同量的标准品到反应液中，看出不出峰，有可能产物浓度低，信号被掩盖。NADP在210nm下检测，应该信号很弱，但浓度如果过高，也会出峰的。也许是测量方法的问题，做做空白对照。如果确实反应了，NADP会全部或部分变成NADPH。
赞一下 回复此楼
创科生物-酶催化www.novocata.com
5楼2014-05-21 12:44:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 00:25 by mibUvS8DDCwf
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-14 23:57 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-14 23:33 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-14 23:13 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 3/150 2026-09-14 23:09 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 3/150 2026-09-14 22:33 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 3/150 2026-09-14 22:24 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:00 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 21:37 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:36 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:33 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:25 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:24 by vZfe6xYu34yj
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-14 21:21 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:37 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 14:57 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭