24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1894  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

~春梦秋云~

金虫 (小有名气)

[求助] 谁用过pEarleyGate 103做拟南芥的瞬时表达,这个载体好用吗? 已有1人参与

本人准备用这个载体做亚细胞定位,预测的位置在叶绿体上,请问有没有人用过这个载体,提供一点经验呢,在此不胜感激!还有做这个怎么做阳性对照呢?
回复此楼
相信黎明不会失约,相信付出必有回报!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

~春梦秋云~

金虫 (小有名气)

都没有人做瞬时表达吗?大家多多提意见啊!
相信黎明不会失约,相信付出必有回报!
7楼2014-05-12 10:58:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

starseacow

专家顾问 (职业作家)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-05-07 00:27:36
这个载体是35S启动子加gateway系统,连接GFP和HIS标签,可以用western检测蛋白表达。做瞬时表达亚细胞定位没有问题。但由于是35S强启动子,可能你需要注意目的蛋白过表达是否对正常定位尤其是叶绿体定位有影响,我没有做过叶绿体相关蛋白,所以无法确定。至于阳性对照,叶绿体本身有自发荧光,>650 nm可以观察到,拿这个可以做一个定位对照。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2014-05-06 23:03:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

~春梦秋云~

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2014-05-06 23:03:53
这个载体是35S启动子加gateway系统,连接GFP和HIS标签,可以用western检测蛋白表达。做瞬时表达亚细胞定位没有问题。但由于是35S强启动子,可能你需要注意目的蛋白过表达是否对正常定位尤其是叶绿体定位有影响,我没 ...

谢谢,听说载体太大会很难转进去吗?还有这个空载体会不会表达GFP呢?听说有的载体是会的。
相信黎明不会失约,相信付出必有回报!
3楼2014-05-08 13:45:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ~春梦秋云~ at 2014-05-08 13:45:05
谢谢,听说载体太大会很难转进去吗?还有这个空载体会不会表达GFP呢?听说有的载体是会的。...

你可以空转载体到发根农杆菌里,瞬时转植物做对照
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
5楼2014-05-08 19:02:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +8 leaflight 2026-03-24 8/400 2026-03-29 01:31 by fmesaito
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学,化工,生物,生医工等专业优秀学子加入! +3 llss0711 2026-03-28 5/250 2026-03-29 00:23 by MRMFYTL
[考研] 0856材料化工调剂 总分330 +11 zhubinhao 2026-03-27 11/550 2026-03-28 20:22 by 418490947
[考研] 275求调剂 +10 Micky11223 2026-03-25 14/700 2026-03-28 15:48 by Micky11223
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 12:04 by 王保杰33
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 274求调剂 +17 顾九笙要谦虚 2026-03-24 23/1150 2026-03-27 15:16 by caszguilin
[考研] 化学308分求调剂 +8 你好明天你好 2026-03-23 9/450 2026-03-27 14:01 by 杨光于青云
[考研] 调剂推荐 +5 清酒714 2026-03-26 6/300 2026-03-27 11:12 by 不吃魚的貓
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[考研] 324求调剂 +8 hanamiko 2026-03-26 10/500 2026-03-27 08:06 by hypershenger
[考研] 317求调剂 +7 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 7/350 2026-03-27 02:29 by fmesaito
[考研] 351求调剂 +4 麦克阿磊 2026-03-24 4/200 2026-03-27 00:32 by wxiongid
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
信息提示
请填处理意见