应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 谁用过pEarleyGate 103做拟南芥的瞬时表达，这个载体好用吗？
91/1返回列表
查看: 2125  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

~春梦秋云~

金虫 (小有名气)

[求助] 谁用过pEarleyGate 103做拟南芥的瞬时表达，这个载体好用吗？ 已有1人参与

本人准备用这个载体做亚细胞定位，预测的位置在叶绿体上，请问有没有人用过这个载体，提供一点经验呢，在此不胜感激！还有做这个怎么做阳性对照呢？
回复此楼

» 猜你喜欢
相信黎明不会失约，相信付出必有回报！
1楼 2014-05-06 21:27:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-05-07 00:27:36
这个载体是35S启动子加gateway系统，连接GFP和HIS标签，可以用western检测蛋白表达。做瞬时表达亚细胞定位没有问题。但由于是35S强启动子，可能你需要注意目的蛋白过表达是否对正常定位尤其是叶绿体定位有影响，我没有做过叶绿体相关蛋白，所以无法确定。至于阳性对照，叶绿体本身有自发荧光，>650 nm可以观察到，拿这个可以做一个定位对照。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2014-05-06 23:03:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

~春梦秋云~

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2014-05-06 23:03:53
这个载体是35S启动子加gateway系统，连接GFP和HIS标签，可以用western检测蛋白表达。做瞬时表达亚细胞定位没有问题。但由于是35S强启动子，可能你需要注意目的蛋白过表达是否对正常定位尤其是叶绿体定位有影响，我没 ...

谢谢，听说载体太大会很难转进去吗？还有这个空载体会不会表达GFP呢？听说有的载体是会的。
赞一下 回复此楼
相信黎明不会失约，相信付出必有回报！
3楼2014-05-08 13:45:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

~春梦秋云~

金虫 (小有名气)
自己顶一下！
回复此楼
相信黎明不会失约，相信付出必有回报！
4楼2014-05-08 17:55:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ~春梦秋云~ at 2014-05-08 13:45:05
谢谢，听说载体太大会很难转进去吗？还有这个空载体会不会表达GFP呢？听说有的载体是会的。...

你可以空转载体到发根农杆菌里，瞬时转植物做对照
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
5楼2014-05-08 19:02:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

~春梦秋云~

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by starseacow at 2014-05-08 19:02:00
你可以空转载体到发根农杆菌里，瞬时转植物做对照...

亲不是应助帖，不能给你评分哦！
赞一下 回复此楼
相信黎明不会失约，相信付出必有回报！
6楼2014-05-12 10:57:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

~春梦秋云~

金虫 (小有名气)
都没有人做瞬时表达吗？大家多多提意见啊！
赞一下 回复此楼
相信黎明不会失约，相信付出必有回报！
7楼2014-05-12 10:58:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逗逼庄庄

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by starseacow at 2014-05-08 19:02:00
你可以空转载体到发根农杆菌里，瞬时转植物做对照...

根不是会自发绿色荧光吗？而且很强，前几天刚看了根。这个要怎么去除？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-01-01 10:26:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 逗逼庄庄 at 2017-01-01 10:26:57
根不是会自发绿色荧光吗？而且很强，前几天刚看了根。这个要怎么去除？
...

在培养和侵染过程中，尽量减少对根的机械损伤。
准备对照，激光共聚焦，在阳性对照，未侵染和阴性对照间仔细调试，寻找最佳测定参数。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
9楼2017-01-01 16:32:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ~春梦秋云~ 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 4/200 2026-11-02 00:50 by xzcv0Tehd8lQ
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 5/250 2026-11-02 00:47 by xzcv0Tehd8lQ
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 8/400 2026-11-02 00:34 by xzcv0Tehd8lQ
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 7/350 2026-11-02 00:34 by xzcv0Tehd8lQ
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-02 00:21 by xzcv0Tehd8lQ
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 15/750 2026-11-01 23:55 by xzcv0Tehd8lQ
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 5/250 2026-11-01 22:24 by xzcv0Tehd8lQ
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 6/300 2026-11-01 22:11 by xzcv0Tehd8lQ
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 8/400 2026-11-01 21:35 by xzcv0Tehd8lQ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 11/550 2026-11-01 21:35 by xzcv0Tehd8lQ
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 5/250 2026-11-01 20:03 by xzcv0Tehd8lQ
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 15/750 2026-11-01 16:52 by BCdvBAEpt3zm
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 13/650 2026-11-01 16:45 by BCdvBAEpt3zm
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 22/1100 2026-11-01 16:35 by BCdvBAEpt3zm
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 8/400 2026-11-01 12:38 by BCdvBAEpt3zm
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 16/800 2026-11-01 12:14 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 13/650 2026-11-01 12:14 by BCdvBAEpt3zm
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 5/250 2026-11-01 11:14 by BCdvBAEpt3zm
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 4/200 2026-11-01 11:01 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 申博自荐 2篇一区TOP+1篇EI+2公开发明专利 2027博士申请 +3 小小阿光 2026-10-27 3/150 2026-10-29 23:56 by 起风了的快乐
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭