应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 综合其他 » EDC/ sulfo-NHS 催化下脂质体连接抗体
51/1返回列表
查看: 1455  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

michaelzang

木虫 (小有名气)

[求助] EDC/ sulfo-NHS 催化下脂质体连接抗体 已有1人参与

小虫，最近在做脂质体连接抗体的实验，实验效果一直不理想，想到小木虫牛人多，希望大家不吝指教。
制备了长循环脂质体，其中PEG端有羧基，利用羧基与抗体的-NH2 连接。
查阅文献说是在EDC与sulfo NHS催化下，反应良好。现把步骤列在下面，希望各位指出问题所：
1、 取脂质体悬液300 ul, 加入EDC 0.4mg 或 0.8 mg, sulfo NHS 1.1 mg 室温搅拌 15 min 后，将 1mg/ml 的 蛋白溶液 83 ul 加入上述溶液，搅拌过夜。
2、取上述反应液20 ul 加入 SDS PAGE 5*loading buffer 5 ul 煮沸 5 min ,上样，电泳后，考马斯亮蓝染色，脱色后观察条带位置。
这是问题就出来了，单纯的抗体与 理论上连接的抗体条带位置是一样的，我就不知道是连上了没测出来，还是根本就没连上。此外还有图片一张，可能是连上的
3. 但是这个条件下，图重复不出来

EDC/ sulfo-NHS 催化下脂质体连接抗体
2014-5-3.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-06 16:13:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

michaelzang

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by john-yong at 2014-06-10 12:51:11
你的脂质体可以离心收集吗？如果可以的话，先离心收集，水洗几次，然后再去检测收集下来的脂质体上有没有抗体，或用跑胶，或用BCA测蛋白

应该是能反映上的
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-16 11:24:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

john-yong

铁杆木虫 (小有名气)

RESEARCHER

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
likedong1021: 金币+1, 应助指数+1, 感谢回帖交流！ 2014-06-10 17:37:49
michaelzang: 金币+29, ★有帮助 2014-06-16 11:23:43
你的脂质体可以离心收集吗？如果可以的话，先离心收集，水洗几次，然后再去检测收集下来的脂质体上有没有抗体，或用跑胶，或用BCA测蛋白
赞一下 回复此楼
goodideas+abenchofextensivework+referenceaccumulation+abitoflucky=innovation
2楼2014-06-10 12:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

namikangti

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by john-yong at 2014-06-10 12:51:11
你的脂质体可以离心收集吗？如果可以的话，先离心收集，水洗几次，然后再去检测收集下来的脂质体上有没有抗体，或用跑胶，或用BCA测蛋白

你好，我最近也在做脂质体与抗体的连接。用的是此方法，不知是否 连接成功，maker旁边的是对照蛋白其余是脂质体已不同的浓度与抗体进行连接。
EDC/ sulfo-NHS 催化下脂质体连接抗体-1


EDC/ sulfo-NHS 催化下脂质体连接抗体-2
60-70-90-80-80-.jpg
赞一下 回复此楼
4楼2015-04-10 23:33:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

s1523466

新虫 (小有名气)
请问楼主的脂质体 悬浮液用的是什么缓冲液，蛋白用的是什么缓冲液呢
赞一下 回复此楼
5楼2018-08-17 09:05:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 17/850 2026-03-22 15:18 by 脱颖而出
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +10 枫桥ZL 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:02 by peike
[考研] 材料工程专硕 348分求调剂 +3 冬辞. 2026-03-17 5/250 2026-03-21 18:47 by 学员8dgXkO
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 二本跨考郑大材料306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:29 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 5/250 2026-03-20 22:11 by 云游重阳
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +5 tcxiaoxx 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:35 by laoshidan
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工专硕调剂 +7 heming3743 2026-03-16 7/350 2026-03-20 19:31 by zhukairuo
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林，给自己招师弟中～ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭