应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 综合其他 » EDC/ sulfo-NHS 催化下脂质体连接抗体
51/1返回列表
查看: 1478  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

michaelzang

木虫 (小有名气)

[求助] EDC/ sulfo-NHS 催化下脂质体连接抗体 已有1人参与

小虫，最近在做脂质体连接抗体的实验，实验效果一直不理想，想到小木虫牛人多，希望大家不吝指教。
制备了长循环脂质体，其中PEG端有羧基，利用羧基与抗体的-NH2 连接。
查阅文献说是在EDC与sulfo NHS催化下，反应良好。现把步骤列在下面，希望各位指出问题所：
1、 取脂质体悬液300 ul, 加入EDC 0.4mg 或 0.8 mg, sulfo NHS 1.1 mg 室温搅拌 15 min 后，将 1mg/ml 的 蛋白溶液 83 ul 加入上述溶液，搅拌过夜。
2、取上述反应液20 ul 加入 SDS PAGE 5*loading buffer 5 ul 煮沸 5 min ,上样，电泳后，考马斯亮蓝染色，脱色后观察条带位置。
这是问题就出来了，单纯的抗体与 理论上连接的抗体条带位置是一样的，我就不知道是连上了没测出来，还是根本就没连上。此外还有图片一张，可能是连上的
3. 但是这个条件下，图重复不出来

EDC/ sulfo-NHS 催化下脂质体连接抗体
2014-5-3.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-06 16:13:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

michaelzang

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by john-yong at 2014-06-10 12:51:11
你的脂质体可以离心收集吗？如果可以的话，先离心收集，水洗几次，然后再去检测收集下来的脂质体上有没有抗体，或用跑胶，或用BCA测蛋白

应该是能反映上的
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-16 11:24:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

john-yong

铁杆木虫 (小有名气)

RESEARCHER

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
likedong1021: 金币+1, 应助指数+1, 感谢回帖交流！ 2014-06-10 17:37:49
michaelzang: 金币+29, ★有帮助 2014-06-16 11:23:43
你的脂质体可以离心收集吗？如果可以的话，先离心收集，水洗几次，然后再去检测收集下来的脂质体上有没有抗体，或用跑胶，或用BCA测蛋白
赞一下 回复此楼
goodideas+abenchofextensivework+referenceaccumulation+abitoflucky=innovation
2楼2014-06-10 12:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

namikangti

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by john-yong at 2014-06-10 12:51:11
你的脂质体可以离心收集吗？如果可以的话，先离心收集，水洗几次，然后再去检测收集下来的脂质体上有没有抗体，或用跑胶，或用BCA测蛋白

你好，我最近也在做脂质体与抗体的连接。用的是此方法，不知是否 连接成功，maker旁边的是对照蛋白其余是脂质体已不同的浓度与抗体进行连接。
EDC/ sulfo-NHS 催化下脂质体连接抗体-1


EDC/ sulfo-NHS 催化下脂质体连接抗体-2
60-70-90-80-80-.jpg
赞一下 回复此楼
4楼2015-04-10 23:33:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

s1523466

新虫 (小有名气)
请问楼主的脂质体 悬浮液用的是什么缓冲液，蛋白用的是什么缓冲液呢
赞一下 回复此楼
5楼2018-08-17 09:05:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 268分085602化学工程调剂 +28 月照花林。 2026-04-09 28/1400 2026-04-12 02:38 by 秋豆菜芽
[考研] 268求调剂 +3 你好tg 2026-04-05 5/250 2026-04-11 16:45 by Delta2012
[基金申请] 山东省基金2026 +4 jerry681 2026-04-08 5/250 2026-04-11 13:59 by laobibibi
[考研] 机械专硕270求调剂，接受跨专业 +12 老师看看我吧aba 2026-04-09 14/700 2026-04-11 10:21 by laoshidan
[考研] 22408 327分求调剂 +4 韵风kon 2026-04-10 4/200 2026-04-11 09:51 by 猪会飞
[考研] 302分求调剂 +9 凡语祈愿 2026-04-08 10/500 2026-04-10 23:26 by 314126402
[考研] 中科院总分315求调剂 +8 lallalh 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:30 by dick_runner
[基金申请] 有爆料，一个青年教师卖房得400万，然后换了一个四青帽子 +9 babu2015 2026-04-08 9/450 2026-04-10 11:43 by 苏东坡二世
[考研] 已调剂 +18 柴郡猫_ 2026-04-09 19/950 2026-04-09 22:10 by 柴郡猫_
[考研] 284求调剂 +7 让我上岸吧阿西 2026-04-09 7/350 2026-04-09 18:59 by haironglove
[考研] 生物学308分求调剂（一志愿华东师大） +13 相信必会光芒万� 2026-04-06 16/800 2026-04-09 13:54 by 徐良白眉大侠
[考研] 353求调剂 +8 晴空万里air 2026-04-07 8/400 2026-04-09 00:18 by GouQ
[考研] 0703化学调剂 348分 +14 唉我超真没招了 2026-04-06 15/750 2026-04-08 19:16 by 我减肥1
[考研] 化学0703-一志愿211-338分求调剂 +10 vants 2026-04-05 11/550 2026-04-08 16:02 by screening
[考研] 一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂 +10 努力奋斗112 2026-04-07 10/500 2026-04-08 15:01 by screening
[考研] 生物调剂 +5 橙子橙子橙子啊 2026-04-05 9/450 2026-04-07 15:31 by 上岸快快
[考研] 调剂 +4 mcbbc 2026-04-06 5/250 2026-04-07 12:33 by upczlm1989
[考研] 319分085702安全工程求调剂 +6 rious 2026-04-05 6/300 2026-04-07 09:42 by jp9609
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 324求调剂 +3 k可乐 2026-04-05 4/200 2026-04-06 09:54 by 蓝云思雨
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭