| 查看: 1647 | 回复: 4 | |||
[求助]
EDC/ sulfo-NHS 催化下脂质体连接抗体 已有1人参与
|
|
小虫，最近在做脂质体连接抗体的实验，实验效果一直不理想，想到小木虫牛人多，希望大家不吝指教。 制备了长循环脂质体，其中PEG端有羧基，利用羧基与抗体的-NH2 连接。 查阅文献说是在EDC与sulfo NHS催化下，反应良好。现把步骤列在下面，希望各位指出问题所： 1、 取脂质体悬液300 ul, 加入EDC 0.4mg 或 0.8 mg, sulfo NHS 1.1 mg 室温搅拌 15 min 后，将 1mg/ml 的 蛋白溶液 83 ul 加入上述溶液，搅拌过夜。 2、取上述反应液20 ul 加入 SDS PAGE 5*loading buffer 5 ul 煮沸 5 min ,上样，电泳后，考马斯亮蓝染色，脱色后观察条带位置。 这是问题就出来了，单纯的抗体与 理论上连接的抗体条带位置是一样的，我就不知道是连上了没测出来，还是根本就没连上。此外还有图片一张，可能是连上的 3. 但是这个条件下，图重复不出来  2014-5-3.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
反应产物总提不上量？聊聊无机焦磷酸酶在核酸合成里的实用价值
已经有0人回复
-
【经验分享】体外转录踩坑无数，挖到一款好用的国产 T7 RNA 聚合酶
已经有0人回复
-
生物物理、生物化学与分子生物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有204人回复
-
体外转录 / PCR 总提不上产量？终于找到稳定好用的无机焦磷酸酶
已经有5人回复
-
[会议预告]2026生物医药产业发展大会
已经有0人回复
-
【产品测评分享】体外转录产量不理想、dsRNA 副产物高？T7 RNA 聚合酶实测体验
已经有4人回复
-
【交流】蛋白标签切除踩坑不断？聊聊 TEV 蛋白酶实操体会
已经有0人回复
-
【交流】SUMO 融合蛋白切标签踩坑？聊聊 SUMO 蛋白酶实操体会
已经有1人回复
-
这些国际期刊正在招募青年编委
已经有1人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
john-yong
铁杆木虫 (小有名气)
RESEARCHER
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 10438.7
- 散金: 6
- 红花: 2
- 帖子: 121
- 在线: 130.8小时
- 虫号: 816268
- 注册: 2009-07-26
- 性别: GG
- 专业: 功能与智能高分子
2楼2014-06-10 12:51:11
3楼2014-06-16 11:24:07
4楼2015-04-10 23:33:31
s1523466
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 32.7
- 散金: 228
- 帖子: 85
- 在线: 37.7小时
- 虫号: 4494529
- 注册: 2016-03-12
- 性别: MM
- 专业: 儿童少年卫生
5楼2018-08-17 09:05:59
