24小时热门版块排行榜    

查看: 683  |  回复: 2
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yjliu1127

银虫 (小有名气)

[求助] 请问怎么研究一个管家蛋白的修饰对这个蛋白与另外一个蛋白相互作用的影响 已有1人参与

某个修饰比如磷酸化修饰对蛋白很重要,我想研究这个修饰对这个蛋白与另外一个蛋白相互作用的影响,如果抑制这个修饰(如磷酸化修饰或其他修饰)就会使蛋白失活,细胞(HEK293T)就不长,因为这个蛋白是和细胞增殖相关的。本来想直接往细胞培养液中加入磷酸化抑制剂,或其它修饰的抑制剂,现在觉得行不通,不知道大家有没有什么好的建议,非常感谢!
回复此楼
nO
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yjliu1127

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-05-03 12:18:47
用酵母三杂交方式证明,也可在体外pull down证明,引入激酶进行磷酸化修饰

非常感谢您的回复!如果这个修饰是多个酶负责完成的,请问用酵母三杂交怎么设计实验?如果在体外做pull down, 从HEK293T细胞提取的蛋白本身就已经修饰的,怎样才可以提取没有修饰的蛋白。如果用E.coli表达没有修饰的真核蛋白,不一定能用呀。不知道怎么办了?
nO
3楼2014-05-03 13:05:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
yjliu1127(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-03 20:26:53
用酵母三杂交方式证明,也可在体外pull down证明,引入激酶进行磷酸化修饰

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-05-03 12:18:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上意见出来了 +11 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 20/1000 2026-08-31 17:36 by dxcharlary
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +6 雨打竹帘 2026-08-30 10/500 2026-08-31 09:29 by huixian257
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见