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ghqiu09

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分子生物学技术 实验

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1楼 2014-04-29 12:23:35
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ghqiu09: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 虽然不是很看得懂，但是受教了。。。。3Q 2014-04-29 15:17:44
silicare: MolEPI+1 2014-05-05 17:33:11
很有求真精神！赞一个！
但是问题是这样的
真核生物天然并不存在基因组外的遗传单元，这一点跟原核生物首先有个大的圈是基因组，还有很多小的圈是质粒不一样。真核生物并不存在控制核外遗传单元的调控系统，不存在质粒相容性的问题。
质粒相容性本质上是质粒复制元件的相容性
对于真核生物而言，这个问题就复杂了，最早在酵母等简单真核生物中确实发现了负责复制的“复制子”
但是高等真核生物，都是多“复制子”同时开工的
转染的质粒，原则上认为不可能参与宿主真核生物的基因组复制，随着细胞分裂的不断稀释，最终丢掉。
这就是为什么真核生物基因操作，所谓稳定株，要以插入基因组为准。
所谓瞬转，其瞬，就在于转入的质粒如果不插入基因组，“一瞬间”就丢掉了。

最后，如果你更留心
你会发现质粒中常用的SV40 polyA signal，是一个神奇的元件
这个元件一般注释起来，身兼三职
1，poly A signal
2，SV40 enhancer
3，SV40 replication origin
我曾经疑惑于后两个功能
分子生物学曾教育我们，SV40存在一个microchromosome，SV40作为一个病毒，进入细胞核之后，其基因组会形成一个类似质粒的独立chromosome，并能随着宿主的复制而复制。
就是这个microchromosome，在研究核小体结构上还立下汗马功劳。
那么，含有这个元件的质粒，转染到真核细胞之后，能不能形成类似的microchromosome呢？

直到我明白了cis-element和trans-factor。。。
这三个是cis-element，这点没错
但是普通真核细胞，只存在第一个功能的trans-factor，所有后面两个功能，虽然有元件有序列，却无法实现。
赞一下(5人) 回复此楼
2楼2014-04-29 12:37:52
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