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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求大虾鉴定我的单酶切图
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带走云彩

银虫 (小有名气)

[求助] 求大虾鉴定我的单酶切图已有3人参与

使用NEB的salI过夜单酶切，左侧为质粒对照，右侧为酶切产物，求鉴定是否切开？

求大虾鉴定我的单酶切图
20140428salI单酶切（2）.jpg
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怎知一死生为虚诞？
1楼2014-04-28 14:48:13
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-28 19:49:56
你的信息不太全面，什么质粒啊多大bp，另外Marker 看着像是DL10000，这张图看得不明显，最好再做个双酶切放在一起看结果，才能更准确判断。sal I挺好用的
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只有不断地失败才会成功
2楼2014-04-28 15:02:33
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猪尾巴草

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
带走云彩: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-04-28 16:43:55
没有切开，如果切开了，会比原质粒条带高点（就是离胶孔近些），因为切开了是线性的
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3楼2014-04-28 16:19:35
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jiajiav1991

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

首先，实验做得不够严肃，最起码要设置重复，还有，酶切的体系，具体几个小时，过夜是个太大的范围，总之，就此分析结果是徒劳。说话语气可能重点儿，但忠言逆耳利于行。
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我不想站得多高，看得多远，只想做好手上的每一件事。
12楼2014-05-03 21:38:59
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普通回帖

带走云彩

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zep616745243 at 2014-04-28 15:02:33
你的信息不太全面，什么质粒啊多大bp，另外Marker 看着像是DL10000，这张图看得不明显，最好再做个双酶切放在一起看结果，才能更准确判断。sal I挺好用的

pdcas9,7000bp左右，DL10000 Marker.
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怎知一死生为虚诞？
4楼2014-04-28 16:21:33
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带走云彩

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 猪尾巴草 at 2014-04-28 16:19:35
没有切开，如果切开了，会比原质粒条带高点（就是离胶孔近些），因为切开了是线性的

我也这样想的，可是过夜单酶切不应该切不开，求指点一下可能的原因。
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怎知一死生为虚诞？
5楼2014-04-28 16:31:44
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zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
带走云彩: 金币+2 2014-04-28 16:58:34
引用回帖:
4楼: Originally posted by 带走云彩 at 2014-04-28 16:21:33
pdcas9,7000bp左右，DL10000 Marker....

那倒是挺奇怪的，你的单切产物大小也是7000左右啊，空质粒也是，建议再做个双酶切，能区分出两个条带大小的，再看看吧，还有你的胶跑的不是很开，试试低浓度的胶，多跑会
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只有不断地失败才会成功
6楼2014-04-28 16:53:00
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带走云彩

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zep616745243 at 2014-04-28 16:53:00
那倒是挺奇怪的，你的单切产物大小也是7000左右啊，空质粒也是，建议再做个双酶切，能区分出两个条带大小的，再看看吧，还有你的胶跑的不是很开，试试低浓度的胶，多跑会...

多谢，一般单酶切条带差异很大么？
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怎知一死生为虚诞？
7楼2014-04-28 16:58:25
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猪尾巴草

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
带走云彩: 金币+1, ★有帮助 2014-05-06 19:52:33
引用回帖:
5楼: Originally posted by 带走云彩 at 2014-04-28 16:31:44
我也这样想的，可是过夜单酶切不应该切不开，求指点一下可能的原因。...

过夜应该是能切开，就要看你温度是不是对的，BUffer有没有加错，Buffer浓度有没有加超，这样都会影响酶活
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8楼2014-04-28 16:59:53
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geneyhh

金虫 (正式写手)
没切开的！

[ 发自小木虫客户端 ]
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9楼2014-04-28 16:59:58
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带走云彩

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by geneyhh at 2014-04-28 16:59:58
没切开的！

斩钉截铁！
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怎知一死生为虚诞？
10楼2014-04-28 17:05:25
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