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cr7ka8

金虫 (初入文坛)

[求助] DNA提取时苯酚 : 氯仿 : 异戊醇(25 : 24 : 1)溶液抽提是怎么操作的??? 已有4人参与

如题,DNA提取时加入苯酚 : 氯仿 : 异戊醇(25 : 24 : 1)后,抽提是怎么操作的?
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Hliotrope

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by cr7ka8 at 2014-04-27 17:43:59
那转速,温度有什么要求吗?...

温度常温就行,转速能离下来就可以,大概7000到120000的样子,我之前看到一个方法中用12000,后来我用7830也能离。。
Someone
7楼2014-04-27 19:50:36
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逍遥e宝

铁杆木虫 (正式写手)

我爱黄赌毒

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cr7ka8: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-04-28 18:49:20
我们一般是加好之后,震荡混匀,然后4度离心12000转 3min,重复三次,后单独氯仿,重复一次。
无数老鼠的生命祭奠了我被偷走的那五年---------------forever宝
8楼2014-04-28 10:00:52
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普通回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cr7ka8: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-04-27 20:46:00
我提的时候用氯仿抽三次就好,不剧烈混匀的,不过现在用试剂盒抽更好

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-04-27 13:06:55
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cr7ka8

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-27 13:06:55
我提的时候用氯仿抽三次就好,不剧烈混匀的,不过现在用试剂盒抽更好

就加进去稍稍混匀就可以了吗?不用离心什么的吗
3楼2014-04-27 13:10:55
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Hliotrope

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cr7ka8: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-04-27 20:45:48
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-27 21:55:57
加入后摇匀,然后离心,会分层,取上层,别沾到中间的白色沉淀,那是蛋白沉淀。
Someone
4楼2014-04-27 14:57:26
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cr7ka8

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Hliotrope at 2014-04-27 14:57:26
加入后摇匀,然后离心,会分层,取上层,别沾到中间的白色沉淀,那是蛋白沉淀。

那转速,温度有什么要求吗?
5楼2014-04-27 17:43:59
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6楼2014-04-27 19:01:03
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hutil1543

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cr7ka8: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-04-28 18:49:26
个人经验,首先一定要用力摇匀,别怕破坏DNA不会的,如果不摇匀会影响后面的电泳的,经验之谈。然后就是离心我是140000rpm,15min,这样离的紧一些,离两次基本就没有蛋白了。
9楼2014-04-28 14:22:15
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东方爱饭

新虫 (初入文坛)

那一次加入的酚氯仿异戊醇的量是多少呢?
10楼2015-12-03 08:54:41
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