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niuniu_910

银虫 (小有名气)

[求助] 真空冷冻干燥机冻干20%的蔗糖已有3人参与

我要冻干酵母,加的保护剂是20%的蔗糖,不知是冷冻干燥机的参数设置不恰当,还是其他原因,冻出来的样品永远都是多泡粘稠状的半干固体,我用的参数是:隔板温度0摄氏度,真空度0.025mbar.我用10%的脱脂奶粉冻干出来的效果就很好,是干燥的圆饼状可以磨成粉末。我该怎样改变参数才能冻干出理想的样品。
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答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

优秀版主

【答案】应助回帖

你在冻干之前用的是-80冰箱预冻的??还是-20??
获取网盘密码请点击:http://emuch.net/bbs/box.php(复制之后,黏贴到浏览器地址栏)
4楼2014-05-03 08:32:17
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

样品浓度大不容易冻干,把样品厚度降低一点,冻干时间延长一点,要是层板可以加热,到冷冻的后期也可以加加热
2楼2014-04-29 12:01:33
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niuniu_910

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2014-04-29 12:01:33
样品浓度大不容易冻干,把样品厚度降低一点,冻干时间延长一点,要是层板可以加热,到冷冻的后期也可以加加热

这些方法都试过了,无效啊!
3楼2014-05-02 11:13:26
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lim1896

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以延长-80℃预冻时间,如果是20%的蔗糖,看水分的含量,在冻干机的说明书上应该会附有不同类型物质的最佳或者建议动干曲线,楼主不妨先找下看看;再如果,酵母之前用甘油处理过的话,建议用缓冲液洗涤两三遍细胞已去除甘油
5楼2014-05-04 12:10:32
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niuniu_910

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 答非所问 at 2014-05-03 08:32:17
你在冻干之前用的是-80冰箱预冻的??还是-20??

是—20,因为是酵母,考虑到存活率的影响,没有用—80条件预冻,我用—40试验过,和—20没有什么差异。
6楼2014-05-04 13:16:51
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niuniu_910

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lim1896 at 2014-05-04 12:10:32
可以延长-80℃预冻时间,如果是20%的蔗糖,看水分的含量,在冻干机的说明书上应该会附有不同类型物质的最佳或者建议动干曲线,楼主不妨先找下看看;再如果,酵母之前用甘油处理过的话,建议用缓冲液洗涤两三遍细胞已 ...

要用—80冻吗?我用的是—20,觉得温度太低会影响酵母的存活率。说明书上没有啊,楼主有没有参考的建议冻干曲线?
7楼2014-05-04 13:21:38
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lim1896

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by niuniu_910 at 2014-05-04 13:21:38
要用—80冻吗?我用的是—20,觉得温度太低会影响酵母的存活率。说明书上没有啊,楼主有没有参考的建议冻干曲线?...

一般预冻的温度尽量低一些,不然样品容易“化掉”,或者容易形成水陷(塌陷),至于塌陷的原因,楼主可以查下相关资料,许多资料里有原理示意图,一看就懂,语言不好表达。至于你说的存活率,如果加了蔗糖,可以考虑下梯度冷冻的方法,即先在4度里放两个小时,再转移至-20度或者-30度两小时,再转移到-80度……如果样品的制备比较复杂,可以考虑下对照试验,或者直接用-80度动一下看看效果,若与之前使用的预冻效果一样,那就可以直接用-80预冻。
至于冻干曲线,如果说明书没有建议的话,那只能是靠自己摸索了,这个真的没法给建议,主要是看机器的类型和操作者的经验,我个人并非这方面的专业,抱歉!
8楼2014-05-04 14:09:45
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zybpxy

铁杆木虫 (著名写手)

致斋大人

引用回帖:
4楼: Originally posted by 答非所问 at 2014-05-03 08:32:17
你在冻干之前用的是-80冰箱预冻的??还是-20??

你在应助的时候看看有没有专家的选项···觉得回答比较有价值的话勾上哦 ~~~
走的太远,别忘了为何出发
9楼2014-05-04 15:42:33
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答非所问

荣誉版主 (职业作家)

ET.....

优秀版主

引用回帖:
9楼: Originally posted by zybpxy at 2014-05-04 15:42:33
你在应助的时候看看有没有专家的选项···觉得回答比较有价值的话勾上哦 ~~~...

好的,谢谢
获取网盘密码请点击:http://emuch.net/bbs/box.php(复制之后,黏贴到浏览器地址栏)
10楼2014-05-04 22:19:42
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