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cy198098

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiangchou812: 金币+1, 有帮助 2014-04-26 11:22:11
把提出来的DNA样品梯度稀释,再试试吧
11楼2014-04-25 10:49:37
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lx李欣

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by xiangchou812 at 2014-04-24 20:50:32
感谢你的建议,PCR时引物浓度应该是多少呢?谢谢!
...

一般10uM就行了!
12楼2014-05-04 16:38:17
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lx李欣

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by xiangchou812 at 2014-04-24 20:46:21
因为是半道出家来做土壤微生物的,我用的土样是条播的黑麦草根际土,提出来后DNA浓度只有30ng/uL左右,这样还能再稀释吗?您做时模板量用多少呢?
...

我觉得这个浓度应该可以了,我之前P的总DNA就十几二十几ng/uL这样!
13楼2014-05-04 16:40:16
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zhongzhen

铜虫 (初入文坛)

楼主,你的问题解决了吗?我现在也遇到这样的问题,请不吝赐教!
14楼2014-12-24 21:48:34
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xiangchou812

木虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by zhongzhen at 2014-12-24 21:48:34
楼主,你的问题解决了吗?我现在也遇到这样的问题,请不吝赐教!

这个好的试剂盒是好,但更重要的可能是PCR扩增的反应体系。比如用高GC含量专用酶或buffer,在反应体系中加BSA等。我当时对提取的样品进行了稀释,然后加了一些BSA,可以扩出来条带,可以试一下。祝好
15楼2014-12-25 11:11:23
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zhongzhen

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
15楼: Originally posted by xiangchou812 at 2014-12-25 11:11:23
这个好的试剂盒是好,但更重要的可能是PCR扩增的反应体系。比如用高GC含量专用酶或buffer,在反应体系中加BSA等。我当时对提取的样品进行了稀释,然后加了一些BSA,可以扩出来条带,可以试一下。祝好...

好的,我试一下,谢谢!
16楼2014-12-25 13:49:01
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