应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求助土壤总DNA提取和16S rDNA扩增
162/2返回列表上一页12
查看: 3160  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

cy198098

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiangchou812: 金币+1, ★有帮助 2014-04-26 11:22:11
把提出来的DNA样品梯度稀释，再试试吧
赞一下 回复此楼
11楼2014-04-25 10:49:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lx李欣

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xiangchou812 at 2014-04-24 20:50:32
感谢你的建议，PCR时引物浓度应该是多少呢？谢谢！
...

一般10uM就行了！
回复此楼
12楼2014-05-04 16:38:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lx李欣

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xiangchou812 at 2014-04-24 20:46:21
因为是半道出家来做土壤微生物的，我用的土样是条播的黑麦草根际土，提出来后DNA浓度只有30ng/uL左右，这样还能再稀释吗？您做时模板量用多少呢？
...

我觉得这个浓度应该可以了，我之前P的总DNA就十几二十几ng/uL这样！
赞一下(1人) 回复此楼
13楼2014-05-04 16:40:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhongzhen

铜虫 (初入文坛)
楼主，你的问题解决了吗？我现在也遇到这样的问题，请不吝赐教！
赞一下 回复此楼
14楼2014-12-24 21:48:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangchou812

木虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by zhongzhen at 2014-12-24 21:48:34
楼主，你的问题解决了吗？我现在也遇到这样的问题，请不吝赐教！

这个好的试剂盒是好，但更重要的可能是PCR扩增的反应体系。比如用高GC含量专用酶或buffer，在反应体系中加BSA等。我当时对提取的样品进行了稀释，然后加了一些BSA，可以扩出来条带，可以试一下。祝好
赞一下 回复此楼
15楼2014-12-25 11:11:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhongzhen

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by xiangchou812 at 2014-12-25 11:11:23
这个好的试剂盒是好，但更重要的可能是PCR扩增的反应体系。比如用高GC含量专用酶或buffer，在反应体系中加BSA等。我当时对提取的样品进行了稀释，然后加了一些BSA，可以扩出来条带，可以试一下。祝好...

好的，我试一下，谢谢！
赞一下 回复此楼
16楼2014-12-25 13:49:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiangchou812 的主题更新
162/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-14 23:57 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-14 23:24 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-14 23:13 by vZfe6xYu34yj
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-14 22:37 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:13 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:12 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:00 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 21:37 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:36 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:24 by vZfe6xYu34yj
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +4 两三岁ss 2026-09-14 4/200 2026-09-14 20:29 by 班主任的同桌
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:21 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 14:57 by Aj1rhIDL5ixY
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭