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七星草

银虫 (小有名气)

[交流] 请问离心取血浆一定需要4度离心吗? 已有6人参与

我在做小鼠实验需要取血浆,但是动物中心没有低温离心机,自己实验室的又没法带过去。而且做完实验的间隔有点长。
请问在离心取血浆的时候一定需要4度吗?还有,我做实验来不及离心的时候可以把血样放在冰上吗?放常温还是放冰上更容易造成溶血?前两次实验做得都不怎么好,有的溶血严重,还得重做。还希望各位帮帮忙,我自己以前是等实验做完了再一起4度、4000rpm离心10min后分装,前后差不多有5个小时了,这对先取血的血样会有影响吧?
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从一开始,我就错了
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redyna渊

铜虫 (小有名气)


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4度离心不是防止溶血的吧,主要是你放时间长的肯定血浆里的酶活指标会有影响,溶血的主要原因是你采血方法的问题,动物最好不应激,有明显的应激很容易溶血,并且动物挂在毛上的血不能要,尽管我明白血量很少,那种很容易造成溶血;另外你要血浆的话抗凝的比例什么的调整好,并且接的时候一定充分混匀,不要下面的成块了,上面的还在接,这么一弹就不好说了。我们实验室都是常温离的,没什么问题,除了夏天特别热的时候
3楼2014-04-22 09:32:42
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普通回帖

zbgood2009

至尊木虫 (职业作家)


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温度的影响挺大的,高速旋转会变热,使得酶之类对温度敏感的成分失效破坏。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
Doyourbest!
2楼2014-04-22 07:47:05
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)


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可以在室温离心,4000g离心力就够了,
未离心的血样放在冰上容易造成溶血,千万注意这一点。
4楼2014-04-22 09:36:33
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yym123321

金虫 (初入文坛)


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4度,保存,离心,不容易溶血
不要轻言放弃
5楼2014-04-22 11:29:57
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七星草

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by redyna渊 at 2014-04-22 09:32:42
4度离心不是防止溶血的吧,主要是你放时间长的肯定血浆里的酶活指标会有影响,溶血的主要原因是你采血方法的问题,动物最好不应激,有明显的应激很容易溶血,并且动物挂在毛上的血不能要,尽管我明白血量很少,那种 ...

是哦,我都没怎么注意小鼠应激的问题,有时候小鼠状态不好采血很慢,溶血就很严重了
从一开始,我就错了
6楼2014-04-22 13:59:35
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七星草

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zbgood2009 at 2014-04-22 07:47:05
温度的影响挺大的,高速旋转会变热,使得酶之类对温度敏感的成分失效破坏。

那我把血取出来放冰上,然后做完实验的时候再去低温离心,应该可以的吧?
从一开始,我就错了
7楼2014-04-22 14:00:38
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redyna渊

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 七星草 at 2014-04-22 13:59:35
是哦,我都没怎么注意小鼠应激的问题,有时候小鼠状态不好采血很慢,溶血就很严重了...

直接摘眼球,一般能放出来1ml足够了,找熟手来。哦,对,不过我们是大些的昆明,有时候大了可以有50g
8楼2014-04-22 19:13:47
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redyna渊

铜虫 (小有名气)


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引用回帖:
7楼: Originally posted by 七星草 at 2014-04-22 14:00:38
那我把血取出来放冰上,然后做完实验的时候再去低温离心,应该可以的吧?...

我印象中实验师是说不要放冰上的,因为一般都没多少,80-100只,一上午肯定杀完了,不会有什么事的,你要担心就杀一批离一批,然后把血浆放冰箱里
9楼2014-04-22 19:16:27
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yaoyao8239

木虫 (小有名气)


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取血浆,温度不应该低于0度,否则红细胞被涨破了,就会造成严重的溶血。
10楼2014-04-22 20:26:51
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