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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » 【求助】富血小板血浆PRP如何制备？
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li.lily

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助】富血小板血浆PRP如何制备？ 已有7人参与

最近按照文献中说的“取新鲜猪血，加入3.8wt%的柠檬酸钠抗凝剂(血液与柠檬酸钠溶液的体积比为9:1)，在1000rmp速率离心20min，收集上层清液，即为富血小板血浆(PRP)”感觉这样制备出来的血浆中血小板的含量相当少啊，还不如全血中的多，到底应该如何制备呢？
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1楼 2010-06-02 18:36:57
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zhaoting2007

金虫 (小有名气)
★
americanyk(金币+1):Thank you 2010-06-02 12:14:06
li.lily(金币+3): 2010-06-02 19:37:58
我也做过，是在200g离心10min，血小板挺多的啊
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2楼2010-06-02 18:57:36
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li.lily

铁虫 (小有名气)
那请问这样提取的血小板能保存吗？因为找血很麻烦，就想着能不能存起来下次备用。还有，这样离心后分了三层，你是怎么提取的，清液和中间层全用？还是弃掉些清液只要中间部分？

[ Last edited by li.lily on 2010-6-2 at 19:39 ]
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3楼2010-06-02 19:37:33
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zhaoting2007

金虫 (小有名气)
★
li.lily(金币+3): 2010-06-07 10:53:16
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-06-28 19:10:44
引用回帖:
Originally posted by li.lily at 2010-06-02 19:37:33:
那请问这样提取的血小板能保存吗？因为找血很麻烦，就想着能不能存起来下次备用。还有，这样离心后分了三层，你是怎么提取的，清液和中间层全用？还是弃掉些清液只要中间部分？

[ Last edited by li.lily on  ...

一般不能长时间保存，放在冰箱里可以存放几天吧，我一般现取现用，最多放一天。我上次做好像就两层吧，一般取清夜，有一次取的时候不小心吸了点界面处的溶液，结果照出来的SEM照片有好多红细胞啊
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4楼2010-06-02 19:57:36
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梦想与现实共舞

木虫 (正式写手)
★
li.lily(金币+4): 2010-06-07 10:53:22
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-06-28 19:10:29
引用回帖:
Originally posted by zhaoting2007 at 2010-06-02 19:57:36:

一般不能长时间保存，放在冰箱里可以存放几天吧，我一般现取现用，最多放一天。我上次做好像就两层吧，一般取清夜，有一次取的时候不小心吸了点界面处的溶液，结果照出来的SEM照片有好多红细胞啊

血小板的保存需要专门的振荡摇床，而且温度严格控制在22度，在一般条件下六小时就失活了，更不能放冰箱。
不同的离心机离心的速率和时间都 不大一样，楼主可以自己试一试，一般上下分层各一半就差不多了。当然还得看血源，有的人本来血小板就少，有的人血小板多

[ Last edited by 梦想与现实共舞 on 2010-6-3 at 08:51 ]
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5楼2010-06-03 08:44:56
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dingyonghui

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
americanyk(金币+1):Thank you 2010-06-23 21:24:41
一般是取全血加入抗凝剂后，1500rpm，15min离心后，分3层，下面为red blood,中间很少的为buffy coat,最上层为PRP，一般只取最上层的PRP。
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Biomaterials
6楼2010-06-23 21:55:44
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blackdust

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-06-28 19:10:08
转数没问题，时间有点长，一般就10-15分钟。这方面的文献多的是，多查找看看，尤其是和你一样直接采用猪血的。
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7楼2010-06-27 10:23:37
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anliang

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
americanyk(金币+1):欢迎讨论！ 2010-07-04 11:14:35
我做的是4度，150g，15min，可以得到很多的PRP，最上面金黄色的就是。我在中检所就是这么做的。怕移液枪转移时出问题，可以将上清液先转移到新试管中。我用的是自己的血。一般是现抽的。
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8楼2010-07-04 16:21:28
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xuduoduoduo

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们是做大鼠，一般就心脏穿刺取血5ml左右，加入0.5ml 0.1M柠檬酸钠抗凝，400g离心15min，收集上清，即为PRP。37℃，PRP经22mM CaCl2处理1h，然后2000×g离心10min，上清即为PRCR，4℃保存。
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9楼2013-04-07 00:05:04
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