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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 高分子生物材料 » 【求助】求助：血小板富集试验
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wccht110

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】求助：血小板富集试验

做生物材料因为要测试抗凝血性能，用到血小板富集试验本人对于血液这块一点都不懂。望哪位好心同仁，有做过这方面的大侠指点一二。
1.血小板富集是不是取血液在1500转每分钟离心15分钟取上清夜即为血小板富集液体。具体是步骤怎么样的？血液有怎么样的要求，多年前的血液可以吗？
2.血液需要生理盐水稀释吗？
3.做一次试验大概要多少血液，现在新鲜血液好难搞到
盼指点。急啊
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1楼 2010-12-16 17:38:29
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yifeng1206

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
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wccht110(金币+1): 2010-12-17 13:36:35
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-12-17 23:59:06
americanyk(金币+1):谢谢回帖交流 2010-12-18 19:41:24
西南交通大学黄楠课题组的抗凝做得很多，你查查相关的文章，都会有描述。
1.新鲜全血液1500rpm离心15分钟取上清夜即为PRP。一般用新鲜血液，以保证实验结果。多年前的血液还能用吗？没用过，不知道
2.血液不要用生理盐水稀释，会发生溶血现象的。
3.做一次试验大概要多少血液？看你具体做什么实验了。浸泡样品用的血浆多，仅仅滴在样品表面的话用的少点，100ul/cm2吧。
用血量不多，自己抽血10-20ml可以做，少量抽血对身体没损坏，相反还有利于加强新陈代谢，但一定要找技术好的老师抽血，要注意卫生和消毒措施。

[ Last edited by yifeng1206 on 2010-12-16 at 22:56 ]
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2楼2010-12-17 05:55:18
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yifeng1206

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
wccht110(金币+1): 2010-12-17 13:36:41
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-12-17 23:59:12
血小板富集液体？听着好别扭啊
应该是 富血小板血浆吧， PRP platelet rich plasma
贫血小板血浆，PPP, platelet poor plasma
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3楼2010-12-17 05:59:43
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zxmxyh

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
wccht110(金币+1): 2010-12-17 13:36:46
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-12-17 23:59:19
建议到当地血站购买 现在血荒过了 只要办好证书 买非常方便 而且很便宜 我们这是20ML=140块 而且提供的都是新鲜血小班

PS血小板5天后就会开始变质
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4楼2010-12-17 10:10:34
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wccht110

铜虫 (初入文坛)
感谢yifeng1206，zxmxyh
还有一个问题：离心后得到的PRP，可以用几天？按ZXMXYH所说的可以用5天的话，需要怎么样保存？
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5楼2010-12-17 13:34:04
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wccht110

铜虫 (初入文坛)
还有采集到的新鲜血液怎么样保存，保存多久的血液算是新鲜血液？
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6楼2010-12-17 13:36:27
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梦想与现实共舞

木虫 (正式写手)
★ ★
wccht110(金币+1):谢谢参与
americanyk(金币+1):谢谢回帖交流 2010-12-18 19:41:39
没见过血站可以直接提供几十毫升的血的，除非是没加抗凝剂或者是由于献血者本身身体原因没采足200cc的。如果没有专门的保存血小板的设施是不可能长期保存血小板的，血小板在体外6小时就会失活。还是不要想怎么去保存了，现抽现做比较实际，除非你们一次可以用完200cc才考虑去血站买血，并且采完血后在两个小时内进行相关实验
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7楼2010-12-18 17:39:45
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zxmxyh

金虫 (小有名气)
★
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-12-19 17:27:05
保存现在的国际通用方法是 20摄氏度震荡保存，关于这个的文献很容易找。

LS的说的太理想化了，现抽现用对于我们大部分实验室来说都是个奢求

对于LZ做的试验 抽后5天内使用 肯定不会影响结果的准确性
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8楼2010-12-19 17:05:03
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jingwang7793

金虫 (小有名气)

血小板黏附实验

★ ★
wccht110(金币+1):谢谢参与
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-12-20 21:36:26
用动物血代替人血,分离方法和结果一样.去上清液. 1毫升血中有30万血小板,所以1毫升血已够用.但分离很难.所以取5-10毫升血离心分离.检测方法用LDH 试剂盒.原理和MTT 一样.
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9楼2010-12-20 15:51:36
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