| 查看: 2891 | 回复: 4 | ||
082023071银虫 (小有名气)
|
[求助]
请用过thrombin酶的前辈指导 已有1人参与
|
|
想用thrombin酶切tag,酶切后的目的蛋白是要用来做蛋白结晶的，要求蛋白纯度比较高。 请问有人用过thrombin酶吗？ 用的什么公司的？酶切效率怎么样啊？酶切后纯化步骤怎样？ 我的目的蛋白大概18KD，中间没有thrombin酶切位点. 金币不多，意思下！ 谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有54人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
082023071
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 789.6
- 帖子: 99
- 在线: 57.5小时
- 虫号: 1078835
- 注册: 2010-08-21
- 性别: MM
- 专业: 寄生虫、寄生虫感染与宿主
2楼2014-04-14 11:28:47
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+3, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-14 11:41:59
082023071: 金币+5, ★★★很有帮助, 很有帮助 2014-04-14 13:06:27
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+3, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-14 11:41:59
082023071: 金币+5, ★★★很有帮助, 很有帮助 2014-04-14 13:06:27
|
酶切效率同底物有很大关系，有的底物酶切位点序列有空间位阻啥的就切的比较慢 具体的效果你需要切一下看看 thrombin一般是37kDa，酶切之后你可以用分子筛分离你的蛋白和thrombin 如果你的Tag前面有Histag的话，会更好，将酶切后的蛋白液过Ni柱，穿透为目的蛋白加thrombin，tag和未完全切个的目的蛋白都在柱子上，然后再使用分子筛分离thrombin和目的蛋白。 用过Sigma的，是冻干粉，效果还不错 |
3楼2014-04-14 11:40:24
082023071
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 789.6
- 帖子: 99
- 在线: 57.5小时
- 虫号: 1078835
- 注册: 2010-08-21
- 性别: MM
- 专业: 寄生虫、寄生虫感染与宿主
4楼2014-04-14 13:05:41
5楼2014-04-17 20:08:50
