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求救关于中药HPLC指纹图谱分析
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刚接手五味子的HPLC指纹图谱分析 很多不懂 今天第一次装柱。采用70％的甲醇平衡柱子 结果： 柱压一直很高，从8MPa一直涨到15MPa，基线却很平，甚至看不到杂质峰。 现在很不清楚柱压为什么这么高。 特询问下，柱压这么高的原因有哪些呢？ 是柱子不干净么？那为何基线很平？ 是预柱的问题么？ 还是机器的问题呢？（有师姐说，那台机器不好的） 还是别的其他原因呢？ 我该如何判断解决呢？ 麻烦大家帮帮忙。谢谢啦！ |
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fangfeng1979
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2楼2008-02-28 19:28:14
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karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢您的回复！
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柱压高的可能的原因及解决办法： 1.柱温低，提高柱温。 2.柱子污染，更换柱子或者再生。 3.流动相有气泡，真空脱气或者超声脱气。 4.使用含有缓冲盐的流动相由于室温低导致部分盐析出。彻底冲洗泵及管路系统和柱子。 5.如果流动相比例固定，又经过一段饱和时间后柱压还不稳，说明泵内或者管路有气泡。 6.当流动相比例发生变化时会产生很多气泡，因此柱压会升高。 7.当流动相比例固定时，50％甲醇柱压较高，随着甲醇比例的提高或者降低柱压会相应下降，而纯水或纯甲醇或乙腈的柱压低（没有混合时产生的气泡）。 8.等度洗脱时使用单泵和事先配制好的流动相柱压要比AB泵比例调节的流动相柱压要低，因为事先脱气了。 9.在没有装柱子和预柱的情况下，柱压应该接近于0，如果高了，说明泵和管路中的滤膜堵塞或者管路堵塞（严重的情况下），应该拆下，使用一定浓度的硝酸浸泡超声。有时也有可能监测器流通池堵塞，这种情况很有可能是使用含有缓冲盐的流动相而又冲洗不够造成的。 |
9楼2008-03-04 14:48:33
tyys98
金虫 (小有名气)
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10楼2008-03-05 02:53:31