| 查看: 720 | 回复: 1 | |||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | |||
[求助]
免疫共沉淀诱饵蛋白不表达 已有1人参与
|
|||
| 之前用酵母双杂交进行筛选是正常表达的，接着用免疫共沉淀验证的时候诱饵蛋白居然没有表达，而且目的蛋白也有两个没表达，用的是最常用的293细胞，求助各位高人帮忙分析下原因。 |
回复此楼» 猜你喜欢
335求调剂
已经有4人回复
-
各位老师好，我的一志愿为北京科技大学085601材料专硕
已经有12人回复
-
359求调剂
已经有7人回复
-
070300化学专业279调剂
已经有10人回复
-
环境工程297分求调剂一志愿杭高院
已经有9人回复
-
一志愿武理材料工程302调剂环化或化工
已经有9人回复
-
309分085801求调剂
已经有5人回复
-
一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕
已经有5人回复
-
材料调剂
已经有4人回复
-
材料调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- CO-IP还是pull down?
已经有5人回复
- 除了酵母双杂交技术 还有没有别的方法可以筛选互作蛋白的
已经有14人回复
- GST pull down 实验细节问题求教
已经有5人回复
- 想请教一下 做植物蛋白的免疫共沉淀需要特别注意什么吗？
已经有6人回复
- 原核表达 蛋白质全在沉淀里，这是怎么回事啊
已经有12人回复
- 求蛋白质相互作用研究方法...
已经有12人回复
- 【分享】蛋白质纯化个人总结2
已经有38人回复
d00614028
管理员
- BioEPI: 4
- 应助: 76 (初中生)
- 金币: 1148.6
- 红花: 4
- 帖子: 150
- 在线: 123.1小时
- 虫号: 650785
- 注册: 2008-11-10
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+5, BioEPI+1, 谢谢参与 2014-04-02 15:22:05
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+5, BioEPI+1, 谢谢参与 2014-04-02 15:22:05
| 酵母双杂相当于是在体外研究蛋白之间的相互作用，你是把基因连接到双杂的载体中，用高表达量的启动子来启动prey 和Bait的表达，用的并不是蛋白本身的启动子；而免疫共沉淀相当于在体内研究蛋白之间的相互作用，这个用的是自身的启动子。所以你双杂能检测到相互作用，免疫共沉淀酶检测到表达也正常的额，你最好先用相应的抗体检测下相关蛋白的表达，提高上样量，带上Actin的对照，看你这几个蛋白在细胞中的表达怎么样，然后再尝试IP哦。 |
2楼2014-04-02 13:27:13
