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求助WB实验问题
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我要做的目的蛋白有两个，分子量分别为28KD、57KD,用6%积层胶，12%的分离胶，电压分别为100V、150V，电泳2小时左右，溴酚蓝未跑出凝胶下端，结束后用考马斯亮蓝染色，溴酚蓝所在部位有一条宽宽的带，透明，似乎未染上色，其余地方均匀蓝色，但未见条带，请问这是怎么回事。 原来怀疑蛋白标本有问题，但是重新测了一下浓度，基本上都在1-2微克/微升，蛋白Marker也看不到应有的条带，配胶用的40%（37.5：1）丙烯酰胺 溶液，1.0M的Tris-cl，10%SDS都是新近配置的，pH值调整很仔细，不知道问题出在哪了，急切盼望您的帮助和指导，谢谢！！！ |
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