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汕头大学海洋科学接受调剂
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herjasmine

新虫 (初入文坛)

[求助] WB扫膜出现背景深且有些条带呈白亮状是怎么回事? 已有3人参与

之前做的一直很好。最近老是出现背景很深而有杂带的情况,膜上还有些条带白的发亮,也不知道是不是目标条带(杂带太多)。且换了抗体后还是会出现这样的问题,而实验室有其他老师做出来也是这样的情况(做的抗体和蛋白都不同)。大家认为可能是什么原因造成的呢?
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herjasmine

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-03-28 21:48:29
图上来瞅瞅,白色条带可能是浓度太高底物都用完了,
也可能就是什么都没有,只是你曝光时间特别长

曝光时间不长,5s后出现的图片上就显示特别亮的条带,就像PCR那种条带一样。应该不是没有。另外黑色的杂带也比较多。
5楼2014-03-29 10:25:18
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
图上来瞅瞅,白色条带可能是浓度太高底物都用完了,
也可能就是什么都没有,只是你曝光时间特别长
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2014-03-28 21:48:29
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d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
既然是整个实验室都是这种情况,可以从以下几个方面考虑:
1. 可能是封闭不够,是不是封闭液过期了,换换试试看看效果会不会好点。
2. 洗脱液有问题,重新配置TBST,看是不是PH值有问题,或者是没有加Tween。
3楼2014-03-28 22:41:28
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herjasmine

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by d00614028 at 2014-03-28 22:41:28
既然是整个实验室都是这种情况,可以从以下几个方面考虑:
1. 可能是封闭不够,是不是封闭液过期了,换换试试看看效果会不会好点。
2. 洗脱液有问题,重新配置TBST,看是不是PH值有问题,或者是没有加Tween。

封闭液和洗脱液都重新配的。
4楼2014-03-29 09:58:57
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