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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » WB扫膜出现背景深且有些条带呈白亮状是怎么回事？
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herjasmine

新虫 (初入文坛)

[求助] WB扫膜出现背景深且有些条带呈白亮状是怎么回事？ 已有3人参与

之前做的一直很好。最近老是出现背景很深而有杂带的情况，膜上还有些条带白的发亮，也不知道是不是目标条带（杂带太多）。且换了抗体后还是会出现这样的问题，而实验室有其他老师做出来也是这样的情况（做的抗体和蛋白都不同）。大家认为可能是什么原因造成的呢？
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1楼 2014-03-28 20:32:51
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d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
既然是整个实验室都是这种情况，可以从以下几个方面考虑：
1. 可能是封闭不够，是不是封闭液过期了，换换试试看看效果会不会好点。
2. 洗脱液有问题，重新配置TBST，看是不是PH值有问题，或者是没有加Tween。
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3楼2014-03-28 22:41:28
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
图上来瞅瞅,白色条带可能是浓度太高底物都用完了,
也可能就是什么都没有,只是你曝光时间特别长
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2014-03-28 21:48:29
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herjasmine

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by d00614028 at 2014-03-28 22:41:28
既然是整个实验室都是这种情况，可以从以下几个方面考虑：
1. 可能是封闭不够，是不是封闭液过期了，换换试试看看效果会不会好点。
2. 洗脱液有问题，重新配置TBST，看是不是PH值有问题，或者是没有加Tween。

封闭液和洗脱液都重新配的。
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4楼2014-03-29 09:58:57
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herjasmine

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-03-28 21:48:29
图上来瞅瞅,白色条带可能是浓度太高底物都用完了,
也可能就是什么都没有,只是你曝光时间特别长

曝光时间不长，5s后出现的图片上就显示特别亮的条带，就像PCR那种条带一样。应该不是没有。另外黑色的杂带也比较多。
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5楼2014-03-29 10:25:18
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