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汕头大学海洋科学接受调剂
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厚德求是

木虫 (著名写手)

Ph. D. Prof.

[求助] 求助!蛋白质同源建模,模板不是同工酶,而且相似性低于30%,下一步怎么办? 已有4人参与

求助!
现在课题的主要目的是通过理性设计来提高酶蛋白的热稳定性,主要的方法是定点突变酶非保守序列上的氨基酸来增加氢键,盐桥(或者二硫键)等。
因为我的模板蛋白是没有已知三维结构的,所以需要用同源建模的方法来模拟出我的蛋白质三级结构,预测保守序列(活性中心)并避开它们在其他地方做突变,再利用计算机模拟突变的结果,选择能够突变的氨基酸,再进行试验验证。
我目前用来建模的软件是DS里面的同源建模板块,有文献报道过对我这个酶进行同源建模,用的是Swiss......我觉得这些人报道的不见得可信,因此我想自己建模看看。
现在的问题是,通过DS模板搜索版块得到的模板(30%相似性,但此模板和文献报道中用过的一样)和我的酶不是同工酶!用这个模板做的模型结果里面的蛋白质一级结构改变了,少了17个氨基酸,而且氨基酸排列顺序也变了!这样就没法做结构评价了!更不要说模拟突变其他位点了,而且模拟出来的活性中心也是很奇怪的梭型而不是圆形,所以我猜用现在这样的方法是没法做出来了。
所以,我想要保证蛋白质一级结构不变,要用什么方法继续建模?求助
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厚德求是

木虫 (著名写手)

Ph. D. Prof.

引用回帖:
10楼: Originally posted by woolley at 2014-03-28 09:07:29
看了一下你的描述
建议你还是使用swiss model进行同源建模
建模后蛋白质一级序列缺失是比较正常的,只要同模板无法align的区域,又位于蛋白质末端的话,都有可能无法出现在模板区域
至于氨基酸排列出问题,倒是没 ...

对,我的蛋白质是酶,反应机理也是有报道过,我现在就想通过建立模型,避开这些个影响催化活性的位点,进行定点突变,利用计算机模拟突变,找到能提高酶刚性的突变位点和突变后氨基酸。
你说的耐热同工酶很有启发性,谢谢!
12楼2014-03-28 11:46:54
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smutao

禁虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
厚德求是: 金币+4, ★★★很有帮助, 感谢您的回答 2014-03-28 11:41:33
月只蓝: 金币+3, 感谢指导! 2014-03-28 20:42:42
本帖内容被屏蔽

2楼2014-03-26 21:33:28
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厚德求是

木虫 (著名写手)

Ph. D. Prof.

引用回帖:
2楼: Originally posted by smutao at 2014-03-26 21:33:28
如果没有数据库里的结构数据,有2条路:
1、你自己测结构
2、同源建模
另外,序列的相似性低不一定代表预测的结构就不合理

那请问我要怎么样才能最近测结构?有什么方法?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2014-03-27 16:11:59
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厚德求是

木虫 (著名写手)

Ph. D. Prof.

引用回帖:
2楼: Originally posted by smutao at 2014-03-26 21:33:28
如果没有数据库里的结构数据,有2条路:
1、你自己测结构
2、同源建模
另外,序列的相似性低不一定代表预测的结构就不合理

刚刚没说清楚,我的意思是:同源建模以外还有哪种方法可以用来预测蛋白质结构的?您能推荐一个方法和参考书籍吗?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2014-03-27 16:16:56
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