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suijinkai

木虫 (小有名气)

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[求助] 间接免疫荧光定位染色步骤中甲醇的作用已有3人参与

我做植物微管的免疫荧光定位，材料固定和细胞壁酶解后，有一步要用甲醇-20℃处理10 min，请教专家这一步的作用是什么？

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机会只给有准备的人！

1楼2014-03-17 10:57:12

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lidongxia

铁虫 (初入文坛)

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137167741: 金币+1, 鼓励交流~~ 2014-03-20 14:33:59

引用回帖:

3楼: Originally posted by suijinkai at 2014-03-17 15:19:25
不好意思，可能是我没表述清楚，我第一步是用甲醛和戊二醛固定，然后是酶解，第三步才用到甲醇，加一抗前一步用triton透化。我这个步骤比较繁琐，是从2010年的一篇文献上学的。所以是前面有固定，后面有透化，中间 ...

这样也不矛盾呀，再中间加一步甲醇的处理，主要的作用是兼顾固定和透膜，我之前做过一个细胞免疫荧光实验，也是需要固定和通透，没加甲醇效果不好，加了之后效果不错。你可以试一下加与不加做个对比，如果不加也没什么影响可以不要这一步。