24小时热门版块排行榜    

查看: 3371  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

suijinkai

木虫 (小有名气)

[求助] 间接免疫荧光定位染色步骤中甲醇的作用 已有3人参与

我做植物微管的免疫荧光定位,材料固定和细胞壁酶解后,有一步要用甲醇-20℃处理10 min,请教专家这一步的作用是什么?
回复此楼
机会只给有准备的人!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

suijinkai

木虫 (小有名气)

★
137167741: 金币+1, 鼓励交流~~ 2014-03-20 14:33:52
引用回帖:
2楼: Originally posted by lidongxia at 2014-03-17 13:37:05
甲醇是脂溶性的固定液,可以破坏细胞的脂质双层体,这样更有利于抗体进入内与相关的抗原结合了。

不好意思,可能是我没表述清楚,我第一步是用甲醛和戊二醛固定,然后是酶解,第三步才用到甲醇,加一抗前一步用triton透化。我这个步骤比较繁琐,是从2010年的一篇文献上学的。所以是前面有固定,后面有透化,中间这个甲醇把我搞蒙了。
机会只给有准备的人!
3楼2014-03-17 15:19:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lidongxia

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+1, 鼓励交流~~ 2014-03-20 14:33:43
suijinkai: 金币+8, ★★★很有帮助 2014-09-04 16:45:48
甲醇是脂溶性的固定液,可以破坏细胞的脂质双层体,这样更有利于抗体进入内与相关的抗原结合了。
时间会给你一切你想要的答案
2楼2014-03-17 13:37:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidongxia

铁虫 (初入文坛)

★
137167741: 金币+1, 鼓励交流~~ 2014-03-20 14:33:59
引用回帖:
3楼: Originally posted by suijinkai at 2014-03-17 15:19:25
不好意思,可能是我没表述清楚,我第一步是用甲醛和戊二醛固定,然后是酶解,第三步才用到甲醇,加一抗前一步用triton透化。我这个步骤比较繁琐,是从2010年的一篇文献上学的。所以是前面有固定,后面有透化,中间 ...

这样也不矛盾呀,再中间加一步甲醇的处理,主要的作用是兼顾固定和透膜,我之前做过一个细胞免疫荧光实验,也是需要固定和通透,没加甲醇效果不好,加了之后效果不错。你可以试一下加与不加做个对比,如果不加也没什么影响可以不要这一步。
时间会给你一切你想要的答案
4楼2014-03-20 13:16:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一个蜗牛壳

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

最近也想做微管的染色,问一下你用的是什么抗体?植物细胞核动物细胞的抗体是一样的吗?
5楼2014-04-30 11:14:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 6PrO1XyZ5URF 2026-11-13 3/150 2026-11-15 16:12 by 0aDbZAghdVq9
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-15 10:52 by xSrQNSSjcgoX
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-15 10:19 by xSrQNSSjcgoX
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 3/150 2026-11-15 08:18 by xSrQNSSjcgoX
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 4/200 2026-11-15 07:45 by xSrQNSSjcgoX
[文学芳草园] 厉娜 +4 张丹枫1991 2026-11-09 6/300 2026-11-15 00:48 by Equinoxhua
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 7/350 2026-11-14 22:44 by Equinoxhua
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-13 11:11 by Equinoxhua
[考博] 27博士申请(市政/环境) +3 ladf 2026-11-12 3/150 2026-11-13 08:19 by Equinoxhua
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 13:02 by ECLTXnJnRSXf
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 5/250 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:08 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +7 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-12 10:03 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 12/600 2026-11-12 09:32 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +8 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 12/600 2026-11-12 09:21 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 czAiolzR0IJC 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:36 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 7/350 2026-11-12 00:44 by 9fOTqj074tIg
信息提示
请填处理意见