24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3019  |  回复: 8

suijinkai

木虫 (小有名气)

[求助] 间接免疫荧光定位染色步骤中甲醇的作用 已有3人参与

我做植物微管的免疫荧光定位,材料固定和细胞壁酶解后,有一步要用甲醇-20℃处理10 min,请教专家这一步的作用是什么?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

机会只给有准备的人!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidongxia

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+1, 鼓励交流~~ 2014-03-20 14:33:43
suijinkai: 金币+8, ★★★很有帮助 2014-09-04 16:45:48
甲醇是脂溶性的固定液,可以破坏细胞的脂质双层体,这样更有利于抗体进入内与相关的抗原结合了。
时间会给你一切你想要的答案
2楼2014-03-17 13:37:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

suijinkai

木虫 (小有名气)


137167741: 金币+1, 鼓励交流~~ 2014-03-20 14:33:52
引用回帖:
2楼: Originally posted by lidongxia at 2014-03-17 13:37:05
甲醇是脂溶性的固定液,可以破坏细胞的脂质双层体,这样更有利于抗体进入内与相关的抗原结合了。

不好意思,可能是我没表述清楚,我第一步是用甲醛和戊二醛固定,然后是酶解,第三步才用到甲醇,加一抗前一步用triton透化。我这个步骤比较繁琐,是从2010年的一篇文献上学的。所以是前面有固定,后面有透化,中间这个甲醇把我搞蒙了。
机会只给有准备的人!
3楼2014-03-17 15:19:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidongxia

铁虫 (初入文坛)


137167741: 金币+1, 鼓励交流~~ 2014-03-20 14:33:59
引用回帖:
3楼: Originally posted by suijinkai at 2014-03-17 15:19:25
不好意思,可能是我没表述清楚,我第一步是用甲醛和戊二醛固定,然后是酶解,第三步才用到甲醇,加一抗前一步用triton透化。我这个步骤比较繁琐,是从2010年的一篇文献上学的。所以是前面有固定,后面有透化,中间 ...

这样也不矛盾呀,再中间加一步甲醇的处理,主要的作用是兼顾固定和透膜,我之前做过一个细胞免疫荧光实验,也是需要固定和通透,没加甲醇效果不好,加了之后效果不错。你可以试一下加与不加做个对比,如果不加也没什么影响可以不要这一步。
时间会给你一切你想要的答案
4楼2014-03-20 13:16:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一个蜗牛壳

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

最近也想做微管的染色,问一下你用的是什么抗体?植物细胞核动物细胞的抗体是一样的吗?
5楼2014-04-30 11:14:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ahhngwj

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
suijinkai: 金币+2, 有帮助 2014-09-04 16:46:06
甲醇可有效去除植物细胞中的自发荧光。而且,它可以通透细胞膜
6楼2014-07-22 21:08:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

suijinkai

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ahhngwj at 2014-07-22 21:08:44
甲醇可有效去除植物细胞中的自发荧光。而且,它可以通透细胞膜

好像可以去叶绿素之类的色素,自发荧光能去吗?有没有依据?我去自发荧光用的是硼氢化钠。
机会只给有准备的人!
7楼2014-09-04 16:47:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

suijinkai

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 一个蜗牛壳 at 2014-04-30 11:14:45
最近也想做微管的染色,问一下你用的是什么抗体?植物细胞核动物细胞的抗体是一样的吗?

我了解的不多,植物抗体好像比较少,动物的很多,但是细胞骨架之类的动植物共有且保守性比较高的蛋白,也可以用动物的抗体,我用的是sigma的T6199和T4026。回的晚了,不好意思。
机会只给有准备的人!
8楼2014-09-04 16:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ahhngwj

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by suijinkai at 2014-09-04 16:47:19
好像可以去叶绿素之类的色素,自发荧光能去吗?有没有依据?我去自发荧光用的是硼氢化钠。...

甲醇可以去叶绿素的
9楼2014-09-04 20:51:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 suijinkai 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +7 关忆北. 2026-04-14 7/350 2026-04-16 01:30 by L0alice
[考研] 300求调剂 +8 橙a777 2026-04-15 8/400 2026-04-16 01:25 by L0alice
[考研] 22408 312求调剂 +20 门路摸摸 2026-04-14 21/1050 2026-04-15 20:39 by cuisz
[考研] 310求调剂 +16 666真好 2026-04-11 18/900 2026-04-15 13:28 by 黑科技矿业
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 农学0904 312求调剂 +4 Say Never 2026-04-11 4/200 2026-04-14 09:10 by zs92450
[考研] 机械还有还有名额吗?太难了 +8 笑笑袁 2026-04-10 8/400 2026-04-14 08:44 by screening
[考研] 一志愿华南理工大学331分材料求调剂 +10 天下ww 2026-04-09 11/550 2026-04-13 23:25 by pies112
[考研] 332求调剂 +15 蕉蕉123 2026-04-10 15/750 2026-04-13 23:12 by pies112
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 考研二轮调剂 +10 故人?? 2026-04-09 10/500 2026-04-13 09:55 by szhize
[考研] 2本,初试303,0860求调剂 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
[考研] 0831生医工第一轮调剂失败求助 +12 小熊睿睿_s 2026-04-11 16/800 2026-04-12 16:28 by 钰璞
[考研] 277 数一104,学硕,求调剂 +21 瓶子PZ 2026-04-09 23/1150 2026-04-11 23:12 by labixiaoqiao
[考研] 一志愿厦大0856,306求调剂 +15 Bblinging 2026-04-11 15/750 2026-04-11 22:53 by 314126402
[考研] 求调剂,一志愿大连理工大学354分 +5 雨声余生 2026-04-11 6/300 2026-04-11 16:12 by 雨声余生
[考研] 282,求调剂 +12 jggshjkkm 2026-04-09 14/700 2026-04-11 09:39 by 猪会飞
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +3 加大号饭盒袋 2026-04-10 3/150 2026-04-10 22:23 by 286640313
[考研] 265求调剂 +12 风说她早忘了 2026-04-10 13/650 2026-04-10 18:56 by chemisry
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
信息提示
请填处理意见