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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » 关于血样的处理问题
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0水晶葡萄0

金虫 (小有名气)

[求助] 关于血样的处理问题 已有3人参与

老鼠用乌拉坦麻醉，灌胃给药，在一定时间眼眦取血，离心，取上清液，放入冰箱中冷冻。用之前，取出溶解，放入600ul乙醇沉淀蛋白，一种方法是涡旋，离心，取上清液进样（液相），另一种方法是超声，离心，取上清液进样。结果，第一种方法，五只老鼠测出的血药浓度差异很大；第二种方法，测定不到药物的峰。
问题：1、用乌拉坦麻醉会影响老鼠对药物的吸收吗？
2、涡旋时间的长短对血药浓度的测定影响很大吗？
3、超声会使药物完全和蛋白结合，二=而检测不到药物峰吗？
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1楼 2014-03-10 09:36:22
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畅_畅

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
0水晶葡萄0: 金币+2, ★★★很有帮助, 好的，谢谢。我用的是大鼠，涡旋也是为了萃取药物。谢谢你的回复 2014-03-10 10:39:58
PSA: 金币+2, 3u 2014-03-10 10:58:38
1.不知你用的大鼠还是小鼠，小鼠眼球取血我没有进行麻醉，而大鼠也不是注射麻药的，只是在取血的时间点用乙醚熏一下，我听说乌拉坦可能会影响药物吸收，但是没有查到过直接的文献证据；2.涡旋是为了萃取药物吗？如果是为了萃取药物的话，那涡旋效果对最后的检测影响很大。一定要涡旋充分；3.不太清楚你具体是什么药物，是否跟蛋白有结合的可能，所以不知道是哪出了问题。但是我觉得至少不应该完全检测不到吧？
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2楼2014-03-10 10:15:45
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
0水晶葡萄0: 金币+1, ★有帮助 2014-03-10 14:46:42
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-22 14:05:10
血样采集方法问题不大。
样品处理步骤通常不这样操作，一般会用液液萃取，用乙醇或者乙腈沉淀蛋白效果不好，容易堵色谱柱。
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3楼2014-03-10 14:40:01
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0水晶葡萄0

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liuzhaomin at 2014-03-10 14:40:01
血样采集方法问题不大。
样品处理步骤通常不这样操作，一般会用液液萃取，用乙醇或者乙腈沉淀蛋白效果不好，容易堵色谱柱。

药物在乙醇中溶解度很大，所以选择用乙醇沉淀蛋白，你们一般用什么沉淀蛋白呢？即使堵色谱柱，也不至于出现不出峰的情况或者每只老鼠处理后数据差异那么大吧？
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4楼2014-03-10 14:46:34
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)
★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-22 14:05:16
引用回帖:
4楼: Originally posted by 0水晶葡萄0 at 2014-03-10 14:46:34
药物在乙醇中溶解度很大，所以选择用乙醇沉淀蛋白，你们一般用什么沉淀蛋白呢？即使堵色谱柱，也不至于出现不出峰的情况或者每只老鼠处理后数据差异那么大吧？...

你这是什么化合物，先查查文献，或许已有现成的处理方法
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5楼2014-03-10 15:48:09
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zhangjingle

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
xiaoxiao270: 金币+1, 多谢 2014-08-22 14:05:21
1、应该不至于导致5只老鼠的血药浓度差异那么大，我们平常用的10%水合氯醛，1ml/250g。
2、有可能是你在涡旋的时候，每次涡旋的力量不同，导致提取出来的药物浓度不同，涡旋的时间长短只会导致药物的提取回收率的问题，而不是5只老鼠的血药浓度差异很大。
3、 超声不会导致药物提取不出来，有可能是药物在超声的过程中不稳定
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6楼2014-08-22 09:43:36
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