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赵洪宇Clytie

新虫 (正式写手)

[求助] 流式细胞术检测细胞因子 已有2人参与

想问一下各位师兄师姐,文章上面讲用流式细胞仪检测胞内的细胞因子是通过体外多克隆激活剂[如佛波酯PMA、离子霉素(ionomycin)或特定的抗原(蛋白质、肽)]激活细胞,同时用莫能霉素或布雷菲德菌素A阻断高尔基体和内质网介导的蛋白质转运,抑制细胞因子释放到细胞外,从而使产生的细胞因子在细胞质内蓄积,信号增强。
    我想问用外来试剂刺激细胞因子生成以后,还怎么定量分析到底细胞原本生成量是多少呢?(研一菜鸟,望大神指点。。。)
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命是弱者借口,运乃强者谦词
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赵洪宇Clytie

新虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by zjf710 at 2014-03-12 09:07:08
采用Meso Scale Diagnostics, LLC (MSD)公司的高通量多因子生物分析技术,MSD基于MULTI-ARRAY技术,组合了整列芯片技术和电化学发光技术,从而获得超乎寻常的灵敏度、广阔的线性范围和出色的便利性。采用流式细胞术 ...

好的,谢谢师兄。
命是弱者借口,运乃强者谦词
6楼2014-03-12 09:58:24
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查看全部 7 个回答

jms_guan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
您好,看了你的问题觉得你有点误解了,已经有研究证实只有激活的细胞亚群可以表达细胞因子,静止的正常淋巴细胞是不能分泌细胞因子的,而你所说的激活正是为了让细胞分泌细胞因子而必须的一步。另外你说的“同时用莫能霉素或布雷菲德菌素A阻断高尔基体和内质网介导的蛋白质转运,抑制细胞因子释放到细胞外”要是不阻断这个蛋白转运的话,那么分泌的细胞因子就会排出细胞外而无法检测。希望这些对你有所帮助。
正在学习搞科研
2楼2014-03-09 21:51:17
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赵洪宇Clytie

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jms_guan at 2014-03-09 21:51:17
您好,看了你的问题觉得你有点误解了,已经有研究证实只有激活的细胞亚群可以表达细胞因子,静止的正常淋巴细胞是不能分泌细胞因子的,而你所说的激活正是为了让细胞分泌细胞因子而必须的一步。另外你说的“同时用莫 ...

哦,那师兄如果是这样的话,怎么检测表达量的改变呢?比如我用ox-LDL刺激巨噬细胞,想检测IL-1b的表达量变化,意思是都要预先激活码?谢谢师兄。
命是弱者借口,运乃强者谦词
3楼2014-03-10 16:40:22
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zjf710

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我明白你的意思,你需要检测细胞上清或细胞裂解液中的细胞因子含量,建议查阅MCD公司的检测试剂盒,可以做,只是成本有点高,我咨询过,量大定制的价格大约80次/1000元,如果你只检测1种,价格可能会上浮。
三人行,必有我师焉
4楼2014-03-12 09:03:03
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