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mororo

金虫 (小有名气)

[求助] 在做毕设的菜鸟新人请教几个基础问题(>_<) 已有1人参与

做诱变,菌液浓度怎么调到10的8次方呀,血球计数板是不是太难数了,而且要在对数期马上照紫外所以来不及,如果是用比浊,标准曲线的测定计数用什么呢?可不可以有更好的办法?

还有在紫外灯下如何操作操作呢,因为是以时间为变量,如何高效的照射,涂布,又尽量减少杂菌的引入?

谢谢大家的关照。

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迷迷糊糊努力往前走阿蕊蕊
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little_Jimmy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dllchina: 金币+5, 鼓励热心应助 2014-03-09 14:42:35
液体样品摇匀后取1ml至含9ml灭菌生理盐水试管中,固体样品取一定重量后放入生理盐水中混匀(例如5g样品加入45ml生理盐水中)标记为-1浓度。以此类推逐步稀释至-8浓度。注意每次做稀释液母液要充分摇匀。血球计数对细胞较小的菌体很难计数,最主要的是血球计数很难区分细胞的活性。测生长曲线除了测OD的方法外也可以使用平板计数法。最后一个问题我不知道你是想做紫外诱变还是无菌操作,保证无菌操作的话实验前开紫外30min,试验台及用75%擦拭,尽可能避免染菌。
我们都是小吉米
2楼2014-03-09 02:13:43
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little_Jimmy

银虫 (小有名气)

不好意思 最后一句没补充完, 75%乙醇。
我们都是小吉米
3楼2014-03-09 02:16:03
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