24小时热门版块排行榜    

查看: 2366  |  回复: 16

白色帝企鹅

新虫 (初入文坛)

[交流] RT反转的时候用的是灭过菌的无菌水,没有用DEPC水,会不会有影响,需要重做吗? 已有13人参与

RT反转的时候用的是灭过菌的无菌水,没有用DEPC水,会不会有影响,需要重做吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yiyi12

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流经验! 2014-03-31 15:40:56
我们向来都是用灭菌水做RT和溶解RNA的。没问题的~
2楼2014-03-07 16:33:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

唐萌2

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 15:41:03
没问题的,我一直都有的灭菌水
3楼2014-03-07 19:32:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 15:41:09
理论上没事,就怕有RNA污染。再一个RNA酶活性较高高温不容易失活。
hehe
4楼2014-03-07 21:15:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 15:41:16
那些理论上的东东只能信一小半,若不是建文库之类的重要实验,随便整

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-03-07 21:47:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白色帝企鹅

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-03-07 21:47:22
那些理论上的东东只能信一小半,若不是建文库之类的重要实验,随便整

我反转之后要构建质粒的,这个算重要实验吗
6楼2014-03-07 21:51:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 15:41:28
引用回帖:
6楼: Originally posted by 白色帝企鹅 at 2014-03-07 21:51:22
我反转之后要构建质粒的,这个算重要实验吗...

很一般的实验啦,反转前RNA酶要是除干净了怎么整都无所谓啦,我提的RNA就是这样。

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-03-07 22:02:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixinyuan

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 15:41:35
实际上只要能确保模板RNA没有被降解,RT反转过程能成功就没有问题,产物是cDNA。
8楼2014-03-07 22:29:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白色帝企鹅

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by yixinyuan at 2014-03-07 22:29:45
实际上只要能确保模板RNA没有被降解,RT反转过程能成功就没有问题,产物是cDNA。

我已经PCR完成,电泳条带大小跟目的基因一致,这算不算是成功了,会不会因为RNA酶的缘故导致突变?
9楼2014-03-07 22:38:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinfeng1985

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
应该不会的。质粒构建后,测序确认下

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
10楼2014-03-08 07:04:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 白色帝企鹅 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +3 且听虎啸 2026-08-17 4/200 2026-08-17 22:31 by ccec101
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +36 医学老男孩 2026-08-13 85/4250 2026-08-17 21:23 by lcmdlut
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +4 基诺咪客 2026-08-17 4/200 2026-08-17 16:10 by Vivilian
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
请填处理意见