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RT反转的时候用的是灭过菌的无菌水,没有用DEPC水,会不会有影响,需要重做吗?
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RT反转的时候用的是灭过菌的无菌水,没有用DEPC水,会不会有影响,需要重做吗?
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RT反转的时候用的是灭过菌的无菌水,没有用DEPC水,会不会有影响,需要重做吗?
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2014-03-07 15:49:32
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我们向来都是用灭菌水做RT和溶解RNA的。没问题的~
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2014-03-07 16:33:58
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没问题的,我一直都有的灭菌水
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2014-03-07 19:32:51
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2014-03-31 15:41:09
理论上没事,就怕有RNA污染。再一个RNA酶活性较高高温不容易失活。
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hehe
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2014-03-07 21:15:16
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那些理论上的东东只能信一小半,若不是建文库之类的重要实验,随便整
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5楼
2014-03-07 21:47:22
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:
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Neo2000
at 2014-03-07 21:47:22
那些理论上的东东只能信一小半,若不是建文库之类的重要实验,随便整
我反转之后要构建质粒的,这个算重要实验吗
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6楼
2014-03-07 21:51:22
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白色帝企鹅
at 2014-03-07 21:51:22
我反转之后要构建质粒的,这个算重要实验吗...
很一般的实验啦,反转前RNA酶要是除干净了怎么整都无所谓啦,我提的RNA就是这样。
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7楼
2014-03-07 22:02:58
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2014-03-31 15:41:35
实际上只要能确保模板RNA没有被降解,RT反转过程能成功就没有问题,产物是cDNA。
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8楼
2014-03-07 22:29:45
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8楼
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yixinyuan
at 2014-03-07 22:29:45
实际上只要能确保模板RNA没有被降解,RT反转过程能成功就没有问题,产物是cDNA。
我已经PCR完成,电泳条带大小跟目的基因一致,这算不算是成功了,会不会因为RNA酶的缘故导致突变?
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9楼
2014-03-07 22:38:21
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应该不会的。质粒构建后,测序确认下
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10楼
2014-03-08 07:04:34
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