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HPLC分离对酸敏感的多肽
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奋发-言午
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HPLC分离对酸敏感的多肽
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分离多肽时流动相一般都会加三氟乙酸。但这次的多肽对酸比较敏感,我决定不在流动相里加酸。
于是测了一下HPLC级乙腈的pH,结果pH大概在3左右,读数不稳定。乙腈应该是碱性的吧?而且纯有机溶剂哪来的氢离子呢?
我试着用甲醇替换乙腈做流动相,同样不加酸。柱压很高,而且没有走出来多肽的峰。
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1楼
2014-02-27 11:14:09
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专业: 化学生物学与生物有机化学
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7楼
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Originally posted by
knomonk
at 2014-02-27 18:16:54
对酸敏感的多肽?我所知的绝大部分的多肽序列都是可以用固相合成,然后三氟乙酸切割。一般的肽对酸都是不敏感的,完全可以用酸性流动相分析。当然也可能你的多肽上连接了酸性环境容易掉的小分子。
是啊,做了一些修饰,有什么办法分离呢
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8楼
2014-03-02 21:37:09
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shale1983
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费姚永芬: 应助指数-1, 这样的回复不算应助哦,期待您更有效的交流,欢迎常来分析版
2014-02-28 08:49:37
楼主,你的问题是什么呢?
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2楼
2014-02-27 14:44:50
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2楼
:
Originally posted by
shale1983
at 2014-02-27 14:44:50
楼主,你的问题是什么呢?
不加酸的乙腈为什么会是酸性呢?
用甲醇替换乙腈做流动相,为什么没走出来多肽的峰?
感谢您的回复!
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3楼
2014-02-27 15:04:44
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anger360
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【答案】应助回帖
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crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~
2014-02-27 16:41:18
pH计测试有机溶剂的pH结果是不可靠的,只能测试水溶液的PH
你的多肽对酸敏感,不知道pH耐受范围是多少,
你用甲醇替换乙腈做流动相梯度是怎么样的,是不是没有洗下来。
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4楼
2014-02-27 15:20:34
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