应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC分离对酸敏感的多肽
111/2返回列表12下一页
查看: 2021  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

奋发-言午

银虫 (小有名气)

[求助] HPLC分离对酸敏感的多肽 已有6人参与

分离多肽时流动相一般都会加三氟乙酸。但这次的多肽对酸比较敏感，我决定不在流动相里加酸。

于是测了一下HPLC级乙腈的pH，结果pH大概在3左右，读数不稳定。乙腈应该是碱性的吧？而且纯有机溶剂哪来的氢离子呢？

我试着用甲醇替换乙腈做流动相，同样不加酸。柱压很高，而且没有走出来多肽的峰。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-02-27 11:14:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

shale1983

铁杆木虫 (正式写手)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
费姚永芬: 应助指数-1, 这样的回复不算应助哦，期待您更有效的交流，欢迎常来分析版 2014-02-28 08:49:37
楼主，你的问题是什么呢？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-02-27 14:44:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anger360

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来~ 2014-02-27 16:41:18
pH计测试有机溶剂的pH结果是不可靠的，只能测试水溶液的PH

你的多肽对酸敏感，不知道pH耐受范围是多少，

你用甲醇替换乙腈做流动相梯度是怎么样的，是不是没有洗下来。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2014-02-27 15:20:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

奋发-言午

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shale1983 at 2014-02-27 14:44:50
楼主，你的问题是什么呢？

不加酸的乙腈为什么会是酸性呢？
用甲醇替换乙腈做流动相，为什么没走出来多肽的峰？

感谢您的回复！
赞一下 回复此楼
3楼2014-02-27 15:04:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奋发-言午

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by anger360 at 2014-02-27 15:20:34
pH计测试有机溶剂的pH结果是不可靠的，只能测试水溶液的PH

你的多肽对酸敏感，不知道pH耐受范围是多少，

你用甲醇替换乙腈做流动相梯度是怎么样的，是不是没有洗下来。

梯度是1-91走了30分钟，这个梯度用乙腈在15分钟出风，用甲醇没洗下来啊。ph最好不要低于5
赞一下 回复此楼
5楼2014-02-27 15:23:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

050241310

铁杆木虫 (著名写手)
杂质比较复杂的话，可以看看用缓冲盐或是离子对试剂

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
6楼2014-02-27 15:47:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

knomonk

新虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
7楼2014-02-27 18:16:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奋发-言午

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by knomonk at 2014-02-27 18:16:54
对酸敏感的多肽？我所知的绝大部分的多肽序列都是可以用固相合成，然后三氟乙酸切割。一般的肽对酸都是不敏感的，完全可以用酸性流动相分析。当然也可能你的多肽上连接了酸性环境容易掉的小分子。

是啊，做了一些修饰，有什么办法分离呢
赞一下 回复此楼
8楼2014-03-02 21:37:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

使用缓冲盐或者其他中性离子对试剂，或者对你的目标物稍作衍生或者修饰，使它耐酸，另外改变分离方法，比如电泳之类的
赞一下 回复此楼
9楼2014-03-03 08:44:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Greatben

银虫 (小有名气)

研发工程师

【答案】应助回帖

用三乙胺跟磷酸的离子对，调PH到6.5，测看看结果怎么样
赞一下 回复此楼
10楼2014-03-17 08:29:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 奋发-言午 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 343求调剂 +6 王国帅 2026-04-10 6/300 2026-04-11 08:52 by zhq0425
[考研] 352 求调剂 +4 yzion 2026-04-11 4/200 2026-04-11 08:38 by 来看流星雨10
[考研] 本科南方医科大学 一志愿985 药学学硕284分 求调剂 +4 弱水听文 2026-04-09 4/200 2026-04-10 22:01 by doctff
[考研] 中科院总分315求调剂 +8 lallalh 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:30 by dick_runner
[考研] 0856专硕求调剂 希望是a区院校 +21 好好休息好不好 2026-04-09 24/1200 2026-04-10 16:58 by luoyongfeng
[考研] 初试261 +3 Asht少 2026-04-10 6/300 2026-04-10 16:38 by Asht少
[考研] 336材料与化工085600求调剂 +21 水星记infp 2026-04-05 24/1200 2026-04-10 15:28 by luoyongfeng
[考研] 298求调剂 +8 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 10/500 2026-04-10 11:25 by 高维春
[考研] 材料专硕283求调剂 +18 试试看呗 2026-04-04 19/950 2026-04-10 10:05 by may_新宇
[考研] 292求调剂 +9 笑笑袁 2026-04-09 9/450 2026-04-10 10:05 by LHGeng
[考研] 一志愿郑州大学 22408 305分求调剂 +3 安小满zzz 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:16 by wp06
[考研] 291求调剂 +7 关忆北. 2026-04-09 8/400 2026-04-09 15:17 by 探123
[考研] 土木水利专硕276分求调剂 +6 我想上学！！6 2026-04-05 9/450 2026-04-08 17:45 by 宋小宝HQ
[考研] 0703调剂，一志愿天津大学319分 +23 haaaabcd 2026-04-05 26/1300 2026-04-08 16:19 by luoyongfeng
[考研] 一志愿哈工大，初试329，求环境科学与工程调剂！ +11 余未辛 2026-04-06 11/550 2026-04-08 15:21 by screening
[考研] 求调剂 +9 月@163.com 2026-04-07 11/550 2026-04-08 14:48 by qlm5820
[考研] 调剂求助（生物与医药） +6 @6952 2026-04-06 6/300 2026-04-07 23:52 by lys0704
[考研] 一志愿南科大生物学297分，求调剂推荐 +8 Y-yyusx 2026-04-06 9/450 2026-04-07 19:38 by biomichael
[考研] 277工科求调剂 +10 1915668 2026-04-04 11/550 2026-04-06 23:53 by 心媛意北
[考研] 一志愿9材料学硕297已过六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-04-04 12/600 2026-04-05 19:04 by 蓝云思雨
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭