应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC分离对酸敏感的多肽
111/2返回列表12下一页
查看: 2400  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

奋发-言午

银虫 (小有名气)

[求助] HPLC分离对酸敏感的多肽 已有6人参与

分离多肽时流动相一般都会加三氟乙酸。但这次的多肽对酸比较敏感，我决定不在流动相里加酸。

于是测了一下HPLC级乙腈的pH，结果pH大概在3左右，读数不稳定。乙腈应该是碱性的吧？而且纯有机溶剂哪来的氢离子呢？

我试着用甲醇替换乙腈做流动相，同样不加酸。柱压很高，而且没有走出来多肽的峰。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-02-27 11:14:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

shale1983

铁杆木虫 (正式写手)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与，应助指数 +1
费姚永芬: 应助指数-1, 这样的回复不算应助哦，期待您更有效的交流，欢迎常来分析版 2014-02-28 08:49:37
楼主，你的问题是什么呢？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-02-27 14:44:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anger360

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来~ 2014-02-27 16:41:18
pH计测试有机溶剂的pH结果是不可靠的，只能测试水溶液的PH

你的多肽对酸敏感，不知道pH耐受范围是多少，

你用甲醇替换乙腈做流动相梯度是怎么样的，是不是没有洗下来。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2014-02-27 15:20:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

奋发-言午

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shale1983 at 2014-02-27 14:44:50
楼主，你的问题是什么呢？

不加酸的乙腈为什么会是酸性呢？
用甲醇替换乙腈做流动相，为什么没走出来多肽的峰？

感谢您的回复！
赞一下 回复此楼
3楼2014-02-27 15:04:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奋发-言午

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by anger360 at 2014-02-27 15:20:34
pH计测试有机溶剂的pH结果是不可靠的，只能测试水溶液的PH

你的多肽对酸敏感，不知道pH耐受范围是多少，

你用甲醇替换乙腈做流动相梯度是怎么样的，是不是没有洗下来。

梯度是1-91走了30分钟，这个梯度用乙腈在15分钟出风，用甲醇没洗下来啊。ph最好不要低于5
赞一下 回复此楼
5楼2014-02-27 15:23:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

050241310

铁杆木虫 (著名写手)
杂质比较复杂的话，可以看看用缓冲盐或是离子对试剂

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
6楼2014-02-27 15:47:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

knomonk

新虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
7楼2014-02-27 18:16:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奋发-言午

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by knomonk at 2014-02-27 18:16:54
对酸敏感的多肽？我所知的绝大部分的多肽序列都是可以用固相合成，然后三氟乙酸切割。一般的肽对酸都是不敏感的，完全可以用酸性流动相分析。当然也可能你的多肽上连接了酸性环境容易掉的小分子。

是啊，做了一些修饰，有什么办法分离呢
赞一下 回复此楼
8楼2014-03-02 21:37:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

使用缓冲盐或者其他中性离子对试剂，或者对你的目标物稍作衍生或者修饰，使它耐酸，另外改变分离方法，比如电泳之类的
赞一下 回复此楼
9楼2014-03-03 08:44:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Greatben

银虫 (小有名气)

研发工程师

【答案】应助回帖

用三乙胺跟磷酸的离子对，调PH到6.5，测看看结果怎么样
赞一下 回复此楼
10楼2014-03-17 08:29:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 奋发-言午 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:48 by ECLTXnJnRSXf
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:31 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:30 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:27 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 10/500 2026-11-12 09:52 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 09:46 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +7 FChKX8meu1ds 2026-11-09 12/600 2026-11-12 09:43 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +8 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 12/600 2026-11-12 09:32 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 5/250 2026-11-12 08:15 by HajghKOMynmz
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 3/150 2026-11-12 07:53 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 gRND4NVAZ8VG 2026-11-11 3/150 2026-11-12 07:42 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:03 by 9fOTqj074tIg
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:30 by 9fOTqj074tIg
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:30 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭