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legend@xx

铁虫 (小有名气)

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[求助] 水体总DNA，感觉各种不对的情况下跑出来的胶，囧，但是Marker都这样，求教已有3人参与

新手上路，大家轻拍哈~~

对象：河水中微生物的总DNA；
方法：CTAB/蛋白酶
电泳条件：1%的胶；
               M：3微升marker+1微升 SYBR Green I；
               样品：3微升样品+1微升 SYBR Green I+1微升 loadingbuffer；
               70V 30min，跑完发现样没动，又用100V 30min又跑了一次。

现在想问：
1.  为什么marker都拖尾这么严重？完全一坨啊。。
2.  第五个样品那一格没有亮光是不是说明DNA没有提取出来啊？顺便问一下，如果是染色剂直接点样的话会亮吗，不太明白？
3.  1、2、3和4、5、6其实是三个样品分别用两种方法做出来的，除了第4个没提出来，5、6很亮，是否可以说第二种方法更适合我的样品呢？

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GOGOGO

1楼2014-02-26 10:51:22

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ifyousee

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【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-26 21:00:32

弱弱的好奇一下，你们的marker是新的还是比较久远的？marker放久了也是会降解的
此外你们用的核酸染料是什么啊？
拍照片的时候可以把曝光时间或是光强度什么的调大一些，让图片亮一些。

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2楼2014-02-26 11:23:43

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legend@xx

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引用回帖:

2楼: Originally posted by ifyousee at 2014-02-26 11:23:43
弱弱的好奇一下，你们的marker是新的还是比较久远的？marker放久了也是会降解的
此外你们用的核酸染料是什么啊？
拍照片的时候可以把曝光时间或是光强度什么的调大一些，让图片亮一些。

marker是刚买的应该没问题 15000bp的
核酸染料是SYBR Green I
谢谢~~